Uporaba diagnostike PCR
Polimerazna verižna reakcija (PCR) v molekularni biologiji se imenuje eksperimentalna metoda odkrivanja virusa. Omogoča znatno povečanje koncentracije določenih fragmentov nukleinske kisline (DNK) v vzorcih biološkega materiala, kar omogoča določanje (prepoznavanje) in štetje.
Analiza se izvede na naslednji način. Genetski material (vzorec krvi), ki bi lahko vseboval želeni gen, se vnese v epruveto. Tudi tam so postavljeni primerji - kemično sintetizirane majhne dolžine želenega gena.
V posodo se doda tudi DNA ali RNA-polimeraza, ki je sposobna zgraditi verigo nukleinske kisline, ki je popolnoma identična prvotnemu. V nastali sestavek je prav tako uveden sklop štirih prostih nukleotidov, poseben gradbeni material za RNA ali DNA, od katerih ena vsebuje radioaktivne delce fosforja.
Nastala zmes segrejemo na 95-96 ° C, zaradi česar se razgradita dva DNA heliksa, ki sta prepletena v običajnem stanju. Potem se pripravek ohladi, v tem času se primerji pritrdijo na želeno področje genoma virusa, ne da bi RNA (ali DNA) ponovno spet ustvarila dvojno spiralo.
Med ohlajanjem polimeraza išče prosto verigo nukleotidov. Za delovanje tega encima potrebujemo eno verigo nukleotidov. Ker polimeraza zdrsne vzdolž DNA verige (kot je obroč z vrvjo), ne more delovati na dvojni vijačnici.
Po tem se izvede ponavljajoči se cikel ogrevanja, zaradi česar so nukleotidne verige ločene. Za vsakega od teh PCR ciklov se količina želenega genskega hepatitisa v vzorcu povečuje v geometrijskem napredovanju, preostali del genetskega materiala pa se linearno proizvaja.
Po čiščenju raztopine nukleotidnih ostankov in ločevanja DNA pramenov s parametrom molekulske mase iz elektroforeze je enostavno ugotoviti, ali želeni gen obstaja v testnem vzorcu ali ne.
Prednosti PCR
Laboratorijska študija z uporabo metode PCR omogoča pridobivanje še več informacij kot preprosto prisotnost virusa RNA. Pri določanju parametra ravni radioaktivnega sevanja je mogoče ugotoviti, katera količina genskega materiala je bila prvotno vsebovana v vzorcu v študiji. V primeru hepatitisa določite stopnjo virusne obremenitve.
Druga prednost te metode je zelo visoka občutljivost CR reakcije. To je veliko višje od klasičnih metod za odkrivanje virusov. V idealnem primeru je za identifikacijo želenega gena le en virus v vzorcu zadosten za PCR.
Poleg tega je PCR popolnoma specifičen. Njegovi primerji so ustvarjeni tako, da popolnoma ustrezajo edinstvenim delom želenih genov, ki jih nima nobenega drugega zaporedja. Obe prstni odtisi so edinstveni, v vsakem genu pa so edinstvena zaporedja nukleotidov.
Kvalitativna PCR analiza
Kvalitativna analiza razkriva le prisotnost virusa v krvi. Ta test je treba opraviti za vse paciente, za katere je bilo ugotovljeno, da imajo protitelesa proti hepatitisu C v krvi. Rezultat je lahko le ena izmed dveh vrednosti: "zaznana" ali "ni bila odkrita". Pri zdravi osebi je treba normo (referenčno vrednost) "ne zaznati".
Obstaja tudi posebna interpretacija takih rezultatov izvedenih kvalitativnih raziskav:
- Rezultat je "odkrit". To pomeni, da obstaja v vzorcu biološkega materiala, ki so ga našli RNA fragment, ki je specifičen za virus hepatitisa C Posledično dejstvo bolnika z okužbo z virusom hepatitisa B s C. Če je rezultat kvalitativnega PCR "odkril", to pomeni, da se virus paralelk in v tem času okuži nove jetrne celice v telesu.
- Rezultat je "ni zaznan". Takšna razsodba pomeni, da je v vzorcu biološkega materiala pridobljen RNA fragmenta ni zaznana v laboratoriju, kar je značilno za bodisi HCV RNA enaki koncentraciji okužbe patogenov v vzorcu je bila pod mejo občutljivosti testa.
V akutni fazi virusa RNA virusa hepatitisa C lahko po kvalitativni študiji z uporabo tehnike PCR po 1-2 tednih po okužbi telesa pokažejo, to je že pred pojavom protiteles proti samemu hepatitisu.
Nezanesljive rezultate analiz te preiskave je mogoče dobiti s:
- kontaminirani biomaterial;
- prisotnost heparina v pacientovi krvi;
- prisotnost v vzorcu kemičnih ali beljakovinskih snovi (zaviralcev), ki vplivajo na različne sestavine PCR.
Za kvalitativno analizo PCR posebna priprava bolnika za študijo ni potrebna. Venska krv se uporablja kot material.
Ocena rezultatov
Kvalitativni testi PCR imajo določeno stopnjo občutljivosti in glede na natančnost raziskave in raven opreme v laboratoriju se lahko razlikujeta med 10 in 500 ie / ml.
To pomeni, da če je virus vzorec krvi, prisotna v zelo nizki koncentraciji lahko (manj kot občutljivost praga laboratorija), nato bolan rezultat bolnika je definirana kot "ne zazna." Zaradi tega, ko se izvaja kvalitativno analizo PCR z nizkimi stopnjami viremije (virus nizka koncentracija), na primer, pri bolnikih, ki se zdravijo protivirusnega zdravljenja, je pomembno vedeti, in prag občutljivosti diagnostičnega sistema.
Variante diagnostičnih sistemov
Za nadzor virološkega odziva se priporoča protivirusno zdravljenje za uporabo diagnostičnih sistemov s pragom občutljivosti najmanj 50 ie / ml. Ti kriteriji so izpolnjene, na primer: analizatorji Cobas Ampicolor HCV test (c natančnost 50 IU / ml) in RealBest HCV RNA (z občutljivostjo 15 IU / ml).
V skladu s priporočili WHO za vzpostavitev dokončne diagnoze hepatitisa C, mora temeljiti izključno na osnovi trojne odkritja virusa RNK v vzorcih seruma pacienta brez drugih vrst hepatitisa marker.
Poleg metod PCR se za odkrivanje HCV RNA pri bolnikih uporablja tudi študija TMA (metoda transkripcijske ojačitve). Ima najboljši prag občutljivosti (5-10 IU / ml), vendar v naši državi ta metoda preskušanja še ni zelo pogosta.
Razpon odkritih sprememb virusa
Ta kakovostna določitev v serumu prisotnosti RNK virusa hepatitisa C omogoča določanje več genotipov tega virusa. Trenutno znanost ve, več kot šest genotipov tega virusa, pa tudi približno 10 podtipov bolezni.
Virusi 1, 2, 3 genotipa so pogosti v naši državi. Laboratories lahko zazna naslednje genotipov: 1a, 1b, 2a, 2b in 2c in 3, 4, 5a in 6 glede na podtip. Za vse modifikacije virusa je specifičnost detekcije 100%.
Kvantitativna analiza PCR
Z uporabo kvantitativnega testa PCR se določi koncentracija virusa hepatitisa v vzorcih krvi (virusna obremenitev). Ta test za viremijo (koncentracija virusa) vam omogoča, da določite število enot določenega genskega materiala (najbolj virusne RNK), ki se odkrije v določeni količini. V tem primeru določite njegovo koncentracijo v 1 ml, kar ustreza 1 cu. glej
Količinski parametri analize so izraženi v številkah, za to uporabo kot enote merjenja mednarodne enote (ie) na mililiter (ml), označene kot ME / ml. V nekaterih laboratorijih se lahko količina virusa določi v drugih enotah: število kopij na ml je označeno kot kopija / ml.
- Časovna razporeditev. Za hepatitis C je takšna kvantitativna analiza PCR opravljena tik pred začetkom zdravljenja. Nato na 1., 4., 12. in 24. tednu. Ocenjevanje na 12. teden je indikativno, omogoča določanje učinkovitosti terapije.
- Priprava na analizo. Za kvantitativno analizo PCR posebna priprava bolnika za študijo ni potrebna. Pol ure pred vzorčenjem ne smete kaditi. Venska kri se uporablja kot laboratorijski material.
Ocena rezultatov
Za različne laboratorijske preskusne sisteme obstajajo različni pretvorbeni faktorji za ta indikator v ie / ml. V povprečju se uporablja konverzijski parameter, pri čemer je 4 kopije / ml = 1 ie / ml. To je, na primer, če laboratorijski oddaja Rezultat analize PCR 2,4 x 10 6 kopij / ml, ta parameter je treba deliti z 4 in 6 * znebiti maj 10 IU / ml.
Visoka je obremenitev 800.000 ie / ml, kar je približno enakovredno indeksu v višini 3.000.000 kopij / ml. Nizka viremija, po mnenju nekaterih avtorjev, ustreza parametrom kvantitativnega PCR pod 400.000 IU / ml.
Kot rezultat kvantitativnega testa se lahko končni rezultati dobijo ne v obliki digitalne vrednosti, temveč: "pod merilnim območjem" ali "ni zaznan".
- Vrednotenje: "pod merilno območje". To kaže, da kvantitativni test ni odkril virusne RNK hepatitisa C, vendar je virus v telesu v zelo majhnih koncentracijah prisoten. To kaže dodaten kvalitativni test, ki potrjuje dejstvo, da je virus prisoten.
- Ocena: "ni zaznana". Ta rezultat kaže, da kvantitativni test ni odkril virusa v vzorcu RNA.
Parameter viralnega bremena, najprej, določa stopnjo infektivnosti bolezni, raven "nalezljivosti" bolnika. Višja je pacientova koncentracija virusa, večja je verjetnost prenosa na druge ljudi. Na primer, ko imaš spolne odnose z bolnim osebo ali navpično potjo. Tak kvantitativni kazalnik pomaga tudi pri določanju učinkovitosti pacientovega zdravljenja.
Izvajanje kvantitativne analize PCC je pomembno za protivirusno terapijo, vrednotenje njenega uspeha in načrtovanje trajanja tečaja. Torej, s hitrim odzivom telesa na zdravljenje in nizko stopnjo viremije, se lahko trajanje zdravljenja zmanjša.
S počasnim zmanjšanjem kvantitativnega PCR parametra je treba protivirusno zdravljenje razširiti ali spremeniti. Če je raven viralnega bremena nizka, je to ugoden dejavnik zdravljenja, če je visoka, potem je uporabljena metoda zdravljenja neučinkovita in je treba spremeniti droge ali metode njihove uporabe.
Kvalitativna analiza za hepatitis C
Pustite odgovor
Kvalitativna analiza polimerazne verižne reakcije - PCR za hepatitis C določa prisotnost ali odsotnost HCV v telesu. V laboratoriju se proučuje struktura RNK, v kateri se nahaja virus. Če se odkrije virus C, je treba opraviti potek zdravljenja, ker zapostavljeno stanje jeter povzroči resne posledice. Kvalitativni PCR se izvede po okrevanju, da potrdi odsotnost protiteles. Imenovani in za preventivni pregled. Z nizko koncentracijo patogena v krvi, PCR (kvalitativna) ne more zaznati ničesar, ker diagnostični sistem ima svoje prage občutljivosti. V primeru začetne stopnje bolezni ali blagih oblik je na PCR končno diagnosticirana ultrazvočna oprema.
Kaj je virus RNA?
Izraz RNA virusa hepatitisa C (ali RNA virusa hepatitisa C) se imenuje sama bolezen jeter. Virus C se veže na zdravo telo celice, ki prodira v notranjost. Sčasoma se razprostira po celem telesu, le da pride v kri. Posledično patogen prodre v jetra, varovalke s svojimi celicami in trdo deluje. Jetrne celice (hepatociti) delujejo pod svojim vplivom, spreminjajo se in od tega propadajo. Dlje, ko je virus C v jetrih, več celic umre. Sčasoma se razvijejo nevarne bolezni, ki povzročajo maligno degeneracijo in smrt.
Okužbe jeter s to vrsto virusa ne moremo nikakor izzvati zunaj. Že več let ali deset let se okuženi osebi zdijo povsem zdravi, le najpogostejši neželeni poizkus pa odkrije patologijo. Pri darovanju krvi za hepatitis preučujemo del verige RNK (ribonukleinske kisline), ki je del človeškega gena (DNK). Rezultati laboratorijskih raziskav se ne smejo uporabljati samo za samozdravljenje, ker je to le kazalnik. Zdravnik bo določil natančno sliko in nadaljnjo diagnozo.
Ko končate: pričevanje študije
Za potrditev HCV je dodeljena PCR analiza (polimerazna verižna reakcija). Študije PCR pomagajo najti patogeni material v strukturi RNA in predpisati učinkovito zdravljenje. Imenuje se v naslednjih primerih:
- prepoznavanje znakov vnetja jeter;
- presejalne študije za preprečevanje;
- pregled oseb, ki so v stiku;
- diagnoza hepatitisa mešanega izvora (opredelitev glavnega patogena);
- Določitev ravni aktivnosti razmnoževanja virusa v kronični obliki;
- ciroza jeter;
- za določitev učinkovitosti predpisanega zdravljenja.
Obstaja kvalitativna in kvantitativna analiza PCR. Kvantitativni PCR prikazuje odstotek RNA z nosilci virusa v krvi, kakovostni PCR pa kaže na virusno prisotnost ali odsotnost. Pozitiven kazalnik kakovosti (prisotnost hepatitisa C RNA) zahteva tudi kvantitativno študijo. Visoka stopnja koncentracije patogena hepatitisa C je povezana s tveganjem prenosa, to je kontaminacije drugih. Nizke količine se bolje zdravijo. Količina virusa RNA v krvi ni povezana z intenzivnostjo bolezni. Analiza PCR je izvedena tudi v primeru interferonske terapije, da bi predpisali trajanje in kompleksnost zdravljenja.
Značilnosti kvalitativne analize PCR za hepatitis C
Kakovostna analiza z indeksom verižne reakcije s polimerazo je dodeljena vsem bolnikom, ki imajo v krvi protitelesa proti hepatitisu C. Kdo je regeneriral in predelal, je treba ponovno testirati. Priporočamo, da se opravi analiza o hepatitisu B, nato v primeru pozitivnega zaključka in o hepatitisu D. Tudi kvalitativno analizirana reakcija je treba opraviti v povezavi z drugimi krvnimi preiskavami. Analize bodo pokazale popolno sliko širjenja virusa.
Iz rezultatov testa bo prikazan le pozitivni test za hepatitis C ali negativen, to je prisotnost ali odsotnost virusa. Če je ugotovitev "odkrita", potem je virus aktiven in še naprej deluje. Oznaka "ni bila najdena" označuje odsotnost virusa ali majhne količine. S tem indikatorjem je treba upoštevati dejstvo, da je analitska občutljivost diagnostičnih sistemov drugačna in da je RNA hepatitis C še vedno v krvi, vendar ni očiten pri analizi.
Posebno občutljiva metoda PCR ultra-hepatitisa C se kaže tudi v skromnih količinah. Uporablja se hibridizacijsko fluorescenčna študija, ki je večkrat višja od standardnih PCR sistemov. Metoda se uporablja v več primerih:
- sumljive skrite oblike hepatitisa C;
- Patogen je potrdil diagnozo PCR, vendar so protitelesa;
- v primeru izterjave;
- ugotoviti zgodnjo stopnjo okužbe.
Pojasnilo analize
Na končno odločitev pri diagnozi vplivajo PCR dekodiranje HCV, zlasti z ultramethodom. Glavna pomanjkljivost te raziskave je strogo spoštovanje sterilnih pogojev za vzorec in materiale. Majhno odstopanje včasih kaže nenatančne zaključke analitika, otežuje diagnozo in nadaljnje zdravljenje. Analiza PCR za določanje RNK virusa hepatitisa z zaupanjem ne kaže vedno slike bolezni, včasih so netočnosti sprejete obeh načinov.
Pri diagnosticiranju virusa hepatitisa je priporočljivo uporabiti celovit pregled.
Norm kazalnikov
Odsotnost JgM protiteles proti RNA pri virusnem hepatitisu C velja za normo pri analizi verižne reakcije s polimerazo. Istočasno ugotovitve serološke analize kažejo prisotnost protiteles proti virusu C, kar je tudi v mejah norme. Kvalitativna definicija ne kaže intenzivnosti bolezni, le odkrije vzročni povzročitelj hepatitisa C v RNA. Taka analiza se ponovi po zdravljenju, da se potrdi dejansko okrevanje.
Odstopanja
Če so prisotna JgM protitelesa proti HCV RNA, to kaže na razvojno okužbo. Bolezen je akutna ali kronična, se manifestira v različnih fazah. Če se zabeleži zmanjšanje števila protiteles, bo analiza pokazala doseganje rezultatov zdravljenja med okrevanjem. V diagnozi so zelo redki primeri napačnih pozitivnih ugotovitev. Najdejo jih pri ženskah med nosečnostjo in pri ljudeh z drugimi nalezljivimi boleznimi.
Analiza PCR za hepatitis C
Diagnoza hepatitisa vključuje celoten sklop testov za ugotavljanje prisotnosti virusa v krvi. Eden od načinov za odkrivanje bolezni je uporaba metode, kot je PCR za hepatitis C. Kaj je to, zakaj je PCR analiza hepatitisa tako pomembna, kako se izvaja in dekodira?
Kaj je to?
Verižna reakcija s polimerazo ali PCR se uporablja za diagnosticiranje razjed želodca, kolitisa, enteritisa. Njena glavna prednost pa je, da pomaga odkriti v telesu sam virus hepatitisa C in protitelesa proti njej, ki imajo sposobnost, da ne reagirajo imunski sistem zaradi njihove zmožnosti mutiranja.
Študija in njeno bistvo sta ustvariti določene pogoje, pod katerimi se pojavi verižna reakcija s hepatitisom RNA. Če se v primerjavi z nukleotidno sekvenco virusa hepatitisa C pojavi naključnost, to kaže, da v krvi obstajajo virusni delci, in se razpad pojavlja v jetrih. Če je količina virusa pod določeno stopnjo, se opravi negativna diagnoza, če je višja - pozitivna.
Obstajajo dve vrsti krvnih preiskav z metodo PCR za hepatitis: kvantitativna analiza in kvalitativna analiza.
Kvantitativni PCR, kot je omenjeno zgoraj, določa koncentracijo RNK virusa hepatitisa. Poleg tega je sposoben zagotoviti podatke o intenzivnosti, s katero se razvije patologija, in učinkovitosti predpisanega zdravljenja. Kvantitativna analiza za hepatitis C je izredno pomembna, saj določa odpornost proti delovanju protivirusnih zdravil in omogoča prilagajanje terapije.
Po tem, ko je bil bolnik zdravljen, PCR pomaga določiti nadaljnji red receptov. V nekaterih primerih so potrebne dodatne raziskave. Na primer, če se raven ALP poveča (vendar ne več kot 2-krat v polletju), analiza pa kaže na virusno obremenitev nad 105 IU / ml, se bolniku dodeli biopsija. Če kvantitativna analiza na PCR odkrije močno vnetje in fibrozo, je bolniku predpisan potek zdravljenja z protivirusnimi zdravili.
V primerih, ko se veliko število virusnih delcev kombinira z visoko ALT, je treba bolnika nemudoma zdraviti brez dodatnih diagnostičnih ukrepov.
Vzemite ta test in ugotovite, ali imate težave z jetri.
Kakovostno razvozlati kazalniki za kvantitativno analizo krvi le usposobljeni in izkušeni strokovnjaki lahko hepatitis in sodobna tehnologija omogoča, da se na nizke koncentracije virusa v krvi.
Kvalitativna PCR analiza je namenjena ugotavljanju in potrditvi dejanske prisotnosti virusa v telesu. Izvaja se z odkrivanjem protiteles proti hepatitisu v krvi. To je kvalitativni test za hepatitis jamči za točnost rezultata za 100%, in vam omogoča, da diagnosticirati v zgodnjih fazah bolezni, ki omogoča, da v boju proti hepatitisu B v prvih tednih po okužbi in povečuje možnosti za popolno okrevanje (v primeru bolezni tipa B).
Prednosti PCR
Pri raziskovanju metode PCR in razkritju krvnega testa na hepatitisu je mogoče določiti tudi genotip povzročitelja bolezni. Obstaja 6 genotipov virusa in veliko število podtipov, toda v naši regiji je porazdelitev 1, 2 in 3 genotipov.
Druge prednosti te vrste diagnoze so:
- Visoka natančnost prejetih kazalnikov in majhna verjetnost napak v njih;
- visoka stopnja občutljivosti na virusne delce v krvi;
- možnost odkrivanja več patogenov;
- diagnostika patogenih intracelularnih mikroorganizmov, ki imajo visoko antigensko spremenljivost;
- delo z dekodiranjem analize o hepatitisu omogoča odkrivanje latentnih tokovnih okužb.
Komu imenuje
Analiza PCR za hepatitis nujno vključuje naslednje kategorije ljudi:
- nosečnice;
- zaposleni v zdravstvenih ustanovah;
- potencialni darovalci krvi in organov;
- tiste, ki imajo značilne znake bolezni;
- Okužene s HIV;
- odvisniki od drog;
- osebe, ki vodijo promiskuitetno spolno življenje.
Kako se izvaja analiza in je potrebno usposabljanje?
Vzorčenje krvi za PCR poteka iz vene. Običajno se to zgodi zjutraj, preden je oseba pojedla, ker mora po jedi opraviti najmanj 8 ur. V ekstremnih primerih lahko krv pregledamo dnevno ali zvečer, časovna razlika med analizo in vnosom hrane pa mora biti vsaj 5 ur.
Človeški dejavnik lahko kvantitativno vplivajo na rezultate: njihova natančnost v nekaterih primerih zmanjša iz 100% na 95%, zato je darovanje krvi, je potrebno pripraviti vnaprej. Kakovost biomateriala za analizo bo primerna, če pacient upošteva naslednja pravila:
- Pred dajanjem krvi lahko pijete samo čisto vodo;
- dva dni pred študijo zavrniti od vnosa ocvrtih in maščobnih živil ter alkoholnih pijač;
- dan pred obiskom v laboratorij naj preneha jemati zdravilo. V primeru, da to ni mogoče, je nujno potrebno opozoriti laboratorijskega pomočnika in zdravnika, ki o tem poroča;
- na predvečer stresnih situacij in fizičnega napora;
- Ne gredo skozi ultrazvočne, radiološke in instrumentalne študije tik pred krvno donacijo;
- uro pred analizo se mora vzdržati kajenja;
- 20 minut pred dostavo krvi je treba motiti, pomiriti in celo dihati.
Če študija gre za otroka, mlajšega od 5 let, morajo starši poskrbeti, da je bil vsakih 10 minut pitne vrele vode, da pol ure pred zaužitjem biomateriala.
Pojasnilo prejetih podatkov
Analiza je lahko predstavljena z besedami (v primeru kvalitativnih raziskav), na primer "ni mogoče najti" ali "pod obsegom sprememb". V prvem primeru to pomeni, da okužba ni bila odkrita. V drugem - da je virus prisoten, vendar v majhnem obsegu. Ta položaj zahteva ponovno preučitev.
Virusna obremenitev se določi s količino infektivne RNK in se označi kot ME / ml ali kopije / ml.
Normalni indikator (norma) kvantitativne analize za hepatitis C je razpon od 1,8x102 do 2,4x107 ie / ml.
Koncentracija virusa v krvi je lahko:
- nizka: od 600 ie / ml do 3x10 4 / ml;
- povprečje: od 3x10 4 ie / ml do 8x10 5 ie / ml;
- visoka: več kot 8x10 5 ie / ml.
Kvantitativna in kvalitativna analiza PCR za hepatitis omogoča ugotavljanje prisotnosti virusa v telesu in ravni njegove koncentracije. Polirazmernaya verižno reakcijo lahko za diagnosticiranje bolezni v povojih, vendar je treba bolnike čimprej obravnavajo v zdravstvenih ustanovah za pomoč in strogo upoštevati priporočila lečečega zdravnika.
Kvalitativna in kvantitativna analiza PCR za hepatitis C: negativno, pozitivno, dekodiranje
Hepatitis C - virusna bolezen jeter s HCV flavi virus povzročil, pri čemer struktura vsebuje molekule ribonukleinska kislina (RNA) (od virusa angleščina hepatitisa C.). RNA nosi genetsko kodo virusa. Njegova prisotnost omogoča analizo PCR za hepatitis C.
HCV je nevarnost za ljudi in da lahko ti serološki okno (čas med okužbo in pojavom reakcije s strani imunskega sistema) dovolj dolgo - od nekaj tednov do šest mesecev.
To ne razkrije okužbe in začne zdravljenje pravočasno.
Glede na posamezne značilnosti gostiteljskega telesa se lahko HCV manifestuje v akutni obliki in se lahko razvije tudi kot kronična bolezen, ki bo zahtevala dolgoročno in drago zdravljenje. Pri odkrivanju protiteles proti HCV se izvajajo številni laboratorijski testi, vključno s PCR za hepatitis C. Ta test se opravi za vse ljudi, v katerih je bila odkrita protitelesa proti HCV.
Kaj je PCR analiza?
Laboratorijska analiza PCR za hepatitis C - študija biološkega materiala za ugotavljanje prisotnosti flavavirusa.
Verižna reakcija v polimerazi (kot je okrajšava dekodirana) prikazuje količinsko vrednost virusne škode organizma, njegove kvalitativne lastnosti in tudi genotip virusa, ki vsebuje RNA.
Na njihovi osnovi, kot tudi na podlagi dodatnih analiz, se določi način in trajanje zdravljenja ter epidemiološki faktor (tveganje prenosa na drugega prevoznika).
Kaj je analiza RNA za hepatitis C?
PCR hepatitisa C se prav tako imenuje RNA analiza (HCV RNA), ker ni znana. Flavavirus vsebuje delce RNK z velikostjo viriona 30-60 nm. Ena od značilnosti tega mikroorganizma je visoka nagnjenost k mutacijam.
Vsaka podvrsta (genotipov) virusa ima drugačno odpornost, kar povzroča različne metode zdravljenja in naravo nadaljnje prognoze za bolnika.
Biološki material (venske krvi) obravnava tešče in običajno testiral PCR v realnem času (visoko občutljivih realnem času diagnostike določiti spodnjo mejo 15 IU / ml pomočjo avtomatiziranega načina zaprt sistem).
Obstajajo še drugi testi, na primer COBAS AMPLICOR z občutljivostjo 50-100 IE / ml. Za katero koli laboratorijsko študijo je pomemben prag občutljivosti, tj. sposobnost reagenta, da zazna minimalno koncentracijo virusa v biološkem materialu.
Vrste analize za hepatitis C z uporabo metode PCR
PCR za hepatitis C vsebuje tri pomembne sestavine:
- kvalitativna analiza;
- kvantitativna analiza;
- genotipizacija.
Ti testi lahko določijo naravo viremije, pa tudi genetske znake patogena. Odvisno od občutljivosti diagnostičnega sistema se test opravi enkrat, včasih pa se opravi še drugi test z bolj občutljivim reagentom, da se potrdijo ali izboljšajo rezultati.
Visokokakovostni PCR hepatitisa C
Analiza PCR za kakovost hepatitisa C je drugo običajno ime za test polimerazne verižne reakcije. Standardna občutljivost preskusa, ki omogoča odkrivanje prisotnosti virusne lezije, je v območju od 10 do 500 IU / ml.
Negativna analiza PCR za hepatitis C kaže, da je koncentracija virusa v pacientovi krvi pod pragom občutljivosti diagnostičnega sistema.
Če je kakovostni PCR dala "ne zaznan" odgovor, je za nadaljnje zdravljenje pomembno, da poznate prag občutljivosti reagenta.
Beljakovinske frakcije proti flavavirusu se pojavijo veliko kasneje.
Kvantitativni PCR hepatitisa C
Kvantitativni PCR hepatitis C je indikator virusne obremenitve, ki odraža stopnjo koncentracije flavavirusa RNA v telesu. To je kazalnik, ki prikazuje, koliko fragmentov virusne RNK je na enem kubičnem centimetru krvi. PCR hepatitisa C RNA rezultate kvantitativne preskusnih v konvencionalnem sistemu so opisani v mednarodnih enot na ml (ie / ml) in se lahko zabeležijo na različne načine, na primer - 1,7 ppm ali 1.700.000 IU / ml.
Kvantitativna PCR diagnoza hepatitisa C se daje bolnikom pred začetkom protivirusne terapije in v 12. tednu zdravljenja za oceno rezultatov izbrane metode za boj proti HCV. Virusna obremenitev vam omogoča prepoznavanje treh pomembnih kazalcev bolezni:
- infektivnost, t.j. stopnja tveganja prenosa virusa iz enega nosilca v drugega (večja je koncentracija flavavirusa RNA, večja je verjetnost okužbe druge osebe, na primer med spolnim stikom);
- način in učinkovitost zdravljenja;
- trajanje in napovedovanje protivirusne terapije (večja je virusna obremenitev, dlje traja zdravljenje).
Kvantitativna PCR diagnoza hepatitisa C je odvisna od vrste laboratorijskega testa in praga njegove občutljivosti. Običajno velja, da je spodnja meja norme do 600.000 ie / ml, povprečna vrednost je v območju od 600.000-700.000 IU / ml. Rezultati od 800.000 ie / ml in več so visoki nivoji virusa, ki vsebuje RNA.
Genotipizacija
Glede na visoko mutacijsko aktivnost HCV v naravi je pomembno, da se na stopnji testiranja določi genotip virusa v pacientovi krvi. Skupno je na planetu zabeleženih 11 genotipov virusa hepatitisa C, ki vključujejo številne podvrste. Na ozemlju Ruske federacije so 1,2 in 3 pogosti.
PCR RNA hepatitisa C skupaj z genotipizacijo je zelo pomembna komponenta analize, ker omogoča zdravniku, da določi odpornost (odpornost) virusa, izbere primerna zdravila in predpisuje potek zdravljenja.
Genotipizacija vam omogoča tudi posredno določanje stanja jeter. Na primer, 3 genotip HCV pogosto spremlja steatoza, v kateri se maščoba kopiči v celicah telesa.
Preskus krvi za PCR pri hepatitisu C naj bi pokazal številko, ki določa genotip. V laboratorijskih odgovorih je lahko napisano "ne tipkano" - in to pomeni, da v človeški krvi obstaja virus, ki ga preskusni sistem ne določa. To lahko pomeni, da genotip ni značilen za določeno geografsko območje. V tem primeru je treba analizo ponovno opraviti z večjo občutljivostjo diagnostičnega sistema.
Dekodiranje analize PCR za hepatitis C
Preizkus za PCR hepatitisa C je mogoče količinsko opredeliti na podlagi zgornjih podatkov. Ob prejemu rezultatov laboratorijskih testov se navadno navedejo naslednji podatki:
- "Najdeno" / "ni bilo mogoče najti" (visokokakovostni PCR za hepatitis C);
- količino frakcij, ki vsebujejo RNK, na primer 831.680 IU / ml (kvantitativni test PCR);
- številka, ki določa genotip HCV, na primer - 1, 2, 3, 4;
- ime testa je najpogosteje v realnem času.
Najpomembnejša pri dešifriranju analize PCR za hepatitis C je druga postavka, ki prikazuje virusno obremenitev, ki določa prognozo, način in trajanje zdravljenja.
Če je PCR analiza za hepatitis C negativna in ELISA pozitivna - kaj to pomeni?
Za dešifriranje laboratorijskih testov je pomembno, da se obrnete na hepatolog ali specialist za nalezljive bolezni, ki bo razložil prejete podatke v skladu z vrsto diagnostičnega sistema in pragom njegove občutljivosti. V medicinski praksi je veliko podatkov o krvnem testu, ki lahko vodijo osebo brez zdravstvene vzgoje v zmedo.
Na primer, če je test za HCV PCR negativne in pozitivne ELISA, lahko kažejo, da v tem času v bolnikovi krvi ni HCV, toda preden je vrsta akutne oblike hepatitisa C. Šteje se, da pozitivno-vezan imunski test (ELISA), kaže, da v krvi so protitelesa, nastala po invaziji na virus v preteklosti. Toda v sodobni medicinski praksi je ELISA analiza ni dovolj zanesljiv in pogosto daje nenavadne rezultate, zato zdravniki ga uporabljajo kot primarni pregleda. Pri diagnosticiranju bolezni so strokovnjaki natančno vodeni s testi PCR.
Koristen videoposnetek
V naslednjem videu je zelo podrobno in zanimivo povedati, kaj je bistvo metode PCR, kako se opravi analiza:
Zaključek
Venska krv se običajno vzame za analizo PCR hepatitisa C. Najpogosteje je dvojno vzorčenje biološkega materiala - za ELISA in neposredno za test PCR. Za pravilne rezultate preskusa je potrebna skladnost z glavnimi pravili laboratorijskega vzorčenja biološkega materiala:
- kri za analizo je dan zjutraj na prazen želodec;
- med ječenjem in odvzemom krvi traja najmanj 8 ur;
- Pred preskusom morate izključiti alkohol in ocvrte živila;
- Med dnevom pred dajanjem krvi se morate izogibati visokemu fizičnemu naporu.
Rezultati krvnega testiranja so ponavadi pripravljeni naslednji dan.
PCR študija o hepatitisu C: vrste, indikacije, transkript
Virusni hepatitis C je resna bolezen, ki se pojavi pri poškodbah jeter. Pri osemdesetih odstotkih bolnikov prehaja v kronično obliko. Virus se multiplicira v jetrnih celicah - hepatocitih - in povzroči njihovo smrt. Mrtvo tkivo se nadomesti z žariščem veznega tkiva, se razvije fibroza.
Z razvojem jetrne fibroze ne more opravljati svoje funkcije, začne cirozo, ki je nevarna za svoje zapletov: večji pritisk na vene, krvavitev iz prebavil, motnje strjevanja krvi, duševne spremembe zaradi možganske poškodbe jeder strupene proizvode.
Vzrok bolezni je okužba z virusom iz družine Flaviviridae, ki je vrsta virusa RNA. To pomeni, da je genetski material, s katerim se proteini patogena sintetizirajo, kodirani v molekuli ribonukleinske kisline. Okužba se pojavi prek krvi, spolno in od nosečnice do ploda. Žal lahko med okužbo in začetkom proizvodnje protiteles preide precej časa - od dveh tednov do šestih mesecev. To ne omogoča ugotavljanja okužbe z metodo imunskega testa encimov in začetek zdravljenja v zgodnjih fazah.
Kaj je PCR analiza?
PCR je metoda molekularne analize, ki omogoča odkrivanje genskega materiala patogena že prvi teden po okužbi z uporabo verižne reakcije s polimerazo. Študija ima visoko specifičnost, natančnost in omogoča ne samo ugotavljanje prisotnosti ali odsotnosti virusa, ampak tudi njegovo koncentracijo in genotip.
Za študijo vzemite pacientovo kri, v kateri se lahko odkrije RNA virusa. V krvi se dodajo primerji - umetno sintetizirani deli želenega gena majhne dolžine in polimeraza RNA je poseben encim, ki pomnoži količino genskega materiala patogena. S pomočjo posebne naprave izvajamo več ciklov ogrevanja in hlajenja. Material nato analiziramo in primerjamo z znanimi virusnimi geni, na podlagi katerih se ugotovi prisotnost ali odsotnost okužbe.
Vrste PCR analize za hepatitis C
Obstajajo tri vrste PCR analize:
- Kvalitativna PCR analiza. Prva faza študije. Omogoča vam identifikacijo genskega materiala virusa v krvi.
Indikacije za analizo PCR za hepatitis C
Študija PCR je predpisana v naslednjih primerih:
- stik z bolnikom, ki bi lahko privedel do okužbe;
- pozitiven encimsko vezan imunski test;
- znaki jetrne ciroze: spremembe velikosti jeter, povečana vranica, videz subkutanega venskega pleksusa na trebuhu;
- pojav simptomov poškodbe jeter: bolečine na desni strani trebuha, porumenelost kože;
- povečana aktivnost ALT in AST v biokemijski analizi krvi;
- pred začetkom zdravljenja za določitev virusne obremenitve;
- spremljanje učinkovitosti protivirusnega zdravljenja;
- po zaključku zdravljenja za spremljanje ponovitve bolezni;
- v prisotnosti diagnosticiranega hepatitisa B, da izključite mešano okvaro jeter.
Dekodiranje PCR študije za hepatitis C
Decodiranje PCR analize in imunskega testa encima za hepatitis C mora obravnavati hepatolog ali specialist za nalezljive bolezni. Analizirati rezultate PCR je potrebno v kombinaciji z biokemičnim testom krvi, biopsijo in ultrazvokom. Samo usposobljeni zdravnik bo lahko analiziral rezultate študij in na podlagi njih predpisal pravo zdravljenje.
Dekodiranje kvalitativne analize.
Genetski material patogena je bil ugotovljen v analiziranem biološkem materialu. Okužba se potrdi.
Okužbe ni, ali je količina RNA patogena pod mejo občutljivosti.
Dekodiranje kvantitativne analize.
Normalna številka za zdrave ljudi. To pomeni, da v testnem materialu ni hepatitis C RNA, ali je njegova koncentracija pod pragom občutljivosti študije.
Koncentracija RNA je pod obsegom kvantifikacije. Takšni rezultati se zelo previdno razlagajo, jih povezujejo s podatki drugih študij, pogosto izvajajo drugo študijo.
Stopnja virusne obremenitve pri določeni koncentraciji se šteje za majhno. Običajno zmanjšanje količine virusa pomeni, da je terapija uspešna.
Več kot 8 * 10 ^ 5 ie / ml
Visoka je stopnja virusne obremenitve pri določeni koncentraciji.
Več kot 2,4 * 10 ^ 7 ie / ml
Količina RNK je nad zgornjo mejo obsega kvantifikacije. Ali sklepe o stopnji virusne obremenitve s tem rezultatom ni mogoče. Običajno se v takih primerih preskus ponovi z redčenjem vzorca krvi.
Dekodiranje genotipov.
Ugotovljena je bila RNA določenega genotipa
V biomaterialu se odkrije virus hepatitisa C specifičnega genotipa in podtipa. Rezultat je kodiran z rimskimi številkami in latinskimi črkami, na primer - 1a, 2b. Obstaja sedem genotipov in šestdeset in sedem podtipov, vendar v Rusiji obstajajo le trije prvi tipi.
Ugotovljeno je bilo RNA virusa hepatitisa C
V krvi se RNA nahaja za redkega genotipa za Rusijo, ki je ni mogoče pripisati prvi, drugi ali tretji vrsti. Potrebujemo več raziskav.
Ta rezultat kaže, da je bolnik zdrav ali da je raven RNA patogena premajhna.
Položaj je možen, če je analiza PCR za hepatitis C negativna in encimski imunski test odkriva protitelesa proti virusu. To pomeni, da ima bolnik hepatitis C v akutni obliki in se ozdravi. Približno dvajset primerov okužbe privede do spontanega zdravljenja, če bolnikovo telo odzove na okužbo.
Kljub dejstvu, da je PCR zelo natančna analiza, se rezultati lahko izkrivljajo v naslednjih primerih:
- kri je bila v laboratorijih prepeljana v neustrezne pogoje, temperaturni režim je bil kršen;
- vzorec biomateriala je bil kontaminiran;
- v krvi so bile preostale sledi heparina in drugih antikoagulantov;
- V preiskovani snovi so bili inhibitorji - snovi, ki počasne ali ustavljajo polimerazno verižno reakcijo.
Prednosti PCR v primerjavi z drugimi metodami
- Diagnoza v zgodnjih fazah. PCR zazna genski material povzročitelja bolezni. S pomočjo imunofluorescenčne analize je mogoče določiti le imunoglobuline - snovi, ki jih telo proizvede kot odgovor na okužbo. V primeru okužbe s hepatitisom C je interval med okužbo in pojav imunskega odziva lahko nekaj tednov in mesecev, ko bo ELISA neučinkovita. PCR bo odgovoril že prvi teden po okužbi.
Kako se pripraviti na dostavo krvi za raziskave PCR
Za PCR analizo se venska krv zbira za hepatitis C. Ponavadi sta dva odmerka krvi vzeta iz bolnikove vene hkrati: prvi se pošlje za PCR in drugi za ELISA. To naredimo tako, da natančneje ocenimo, kako slabo je bolnik okužen z virusom in kako se imuniteta bori proti njej.
Običajno so za bolnika potrebna naslednja pravila:
- krvni test se vzame zjutraj;
- odmik med zadnjim obrokom in dobavo krvi mora biti osem do deset ur;
- dva ali tri dni pred analizo morate odpovedati ocvrto in maščobo in alkohol;
- za štiriindvajset ur pred analizo se mora pacient izogibati fizični napori: ne nosite uteži, ne udeležujte telovadnice ali bazena.
Diagnoza hepatitisa C s PCR
V klinični praksi se vedno bolj uporablja verižna reakcija s polimerazo (PCR), da se ugotovijo vzroki različnih virusnih bolezni, vključno z diagnozo viralnega hepatitisa C.
Svetovanje pri hepatologih
V letu 2012 je prišlo do preboj v zdravljenju hepatitisa C. Razvili so se novi protivirusni zdravili z direktnim delovanjem, ki z verjetnostjo 97% popolnoma olajšajo bolezen. Od takrat se hepatitis C uradno šteje za polno zdravilno bolezen v medicinski skupnosti. V Ruski federaciji in državah CIS so droge predstavljene blagovne znamke cofosbuvir, daklataswir in lepidasvir. V tem trenutku se je na trgu pojavilo veliko ponaredkov. Zdravila ustrezne kakovosti lahko kupite le pri podjetjih, ki imajo licenco in ustrezno dokumentacijo.
Pojdite na spletno mesto uradnega dobavitelja >>
Za diagnozo se PCR pogosto uporablja v različnih modifikacijah. S pomočjo PCR za hepatitis C je mogoče ugotoviti prisotnost virusa hepatitisa C v pacientovi krvi in jo natančno diagnosticirati.
Razlike v analizi
Tehnika PCR je pred nekaj desetletji postala dostopna zdravnikom. Temelji na večkratnem kopiranju določenega fragmenta virusne ali bakterijske RNK ali DNK, ki ji sledi odkrivanje (prepoznavanje danega fragmenta) v serumu pacientove krvi.
V tem primeru obstajata dva bistveno drugačna načina PCR-študije: kvantitativna in kvalitativna.
Kvalitativna metoda omogoča le odgovor na vprašanje: ali obstaja genetski material določenega virusa v biološkem materialu (krvni serum, slina, seminalna tekočina itd.)?
Kvantitativna metoda, po drugi strani, omogoča določanje količine tega genskega materiala, ki je v nekaterih primerih potreben za določitev stopnje bolezni ali oceno učinkovitosti terapije.
Kakovostna varianta PCR v primeru bolezni
S kvalitativno varianto PCR analizo s to boleznijo lahko zazna dejstvo prisotnosti hepatitisa C virusne RNA v bioloških tekočinah (seruma, sline in podobne. D.) pacienta. Tako je lahko rezultat analize le dve vrsti: pozitiven ali negativen. V tem primeru je zelo pomembno, njegovo pravilno dekodiranje.
- pozitiven rezultat določanja količine RNA virusni hepatitis C zdravniki pravijo, da je v raziskavi biološke tekočine RNA virusa. V skladu s tem je bolnik okužen z njim, in je zato možna diagnoza hepatitisa C. Vendar pa je vedno spominjal o možnosti lažno pozitivnih rezultatov analize;
- Negativno analiza PCR kaže na odsotnost HCV RNA v biološki tekočini testnega ali vsebine RNA molekul v tekoči vzorec, je bila prenizka in je pod občutljivosti metode robnih PCR. Negativen rezultat testa ne more vedno nakazovati odsotnosti virusa v krvi. Vedno je treba upoštevati možnost lažnih negativnih rezultatov analize s strani zdravnika.
Z razvojem akutne oblike hepatitisa C izvedba visoko kakovostnega testa PCR omogoča ugotavljanje dejstva bolezni v roku 1-3 tednov po vstopu virusa v človeško telo.
Lažni negativni rezultati so lahko posledica:
- vstop v biološki material (kri) onesnaževalnih snovi;
- Uporaba heparina za preprečevanje strjevanja krvi v epruveti ali za njegovo uporabo pri bolniku;
- prodor v material, ki ga proučujejo snovi iz okolja, blokiranje encimov, ki se uporabljajo v PCR.
Pred izvajanjem kvalitativne diagnostične metode PCR pacient ne sme upoštevati posebnih priporočil. Za to je potrebno le analizirati krv iz bolnikovega vena.
Količinska varianta PCR
Uporaba kvantitativne PCR analize nam omogoča, da ugotovimo ne le dejstvo prisotnosti virusa v krvi, temveč tudi število virusnih delcev v kateri koli biološki tekočini (tako imenovano virusno obremenitev). S pomočjo te vrste PCR je mogoče določiti število kopij HCV RNA, ki krožijo v določeni količini.
Rezultat te vrste PCR je izražen v numeričnih vrednostih, kjer je merska enota mednarodne enote na mililiter - ME / ml.
Izvedba podobne vrste diagnoze PCR se uporablja na določen dan zdravljenja za virusni hepatitis C. Prva definicija virusnega bremena se pojavi, ko bolnik vstopi v bolnišnico. Nadaljnja analiza se opravi v 1., 4., 12. in 24. tednu od začetka uporabe zdravil. Že v 12. tednu lahko rečete, ali je terapija učinkovita ali ne.
V zadnjem času sem prebral članek, ki opisuje uporabo kompleksa zdravil "SOFOSBUWIR DAKLATASVIR "za zdravljenje hepatitisa C. S tem zapletenim, se lahko FOREVER znebite HEPATITIS C.
Nisem navajen, da zaupam nobenim informacijam, vendar sem se odločil, da ga preverim in naročim. Droge niso poceni, življenje pa je drago! Nisem čutil kakšnih neželenih učinkov iz postopka, že sem mislil, da je bilo vse zaman, a mesec dni kasneje sem opravil teste in PCR ni bil odkrit, ga po enem mesecu zdravljenja ni bilo mogoče najti. Kardinalno izboljšano razpoloženje, spet je obstajala želja, da živimo in uživamo v življenju! Zdravilo sem vzel 3 mesece, zaradi česar virus ni več. Poskusite z vami in če vas zanima, je spodnja povezava članek.
Posebno pripravite bolnika na študijo, ni potrebno. Priporočljivo je, da na dan preskusa ne kadite. Kot preskusni material se uporablja kri iz vene.
Po izvedbi kvantitativnega PCR je treba razbrati dobljene rezultate. Pojem "norma" v takih primerih ne obstaja. Za dekodiranje se uporablja posebej razvita gradacija kazalnikov:
- Rezultati: Nedoločeno - RNA virusom hepatitisa C pri pacientu, ki je venske krvi ni identificirana (negativen rezultat), ali pa vsebuje zelo majhno količino ne omogoča načina njegovega identifikacijo (5 IU / ml - pozitivni testnega Take virusne obremenitve močno. Indikator učinkovitosti terapije in uspešnega poteka bolezni;
- rezultat študije:> 8 * 10 5 ME / ml - pozitiven rezultat testa. Raven obremenitve je zelo visok. Slaba napoved poteka bolezni in potreba po popravilu ali zamenjavi uporabljenega zdravila.
Pomembno je vedeti, da prejeto stopnjo virusne obremenitve ne odražajo resnosti poteka patologije in stopnje uničenja jeter. Za to obstajajo še druge metode biokemijskih raziskav. Za pravilno izbiro metod zdravljenja je potrebno poznati genotip virusa hepatitisa C.
Kaj kaže virusna obremenitev?
- Visoka stopnja koncentracije virusnih delcev v bioloških tekočinah, še posebej v krvi, je povezana z visokim tveganjem prenosa virusa med spolnim odnosom ali med nosečnostjo od matere do ploda.
- Število delcev virusa je odraz učinkovitosti uporabljenih zdravil in omogoča racionalno izbiro uporabljenih zdravil in odmerkov.
Ultrazvocna diagnostična metoda PCR
Do danes lahko preizkusite tako imenovani ultra PCR za opredelitev virusa hepatitisa C. Popolnoma se ta metoda imenuje PCR s študijo hibridizacije in fluorescence v realnem času.
Ko je prikazan ultra-PCR:
- V primerih suma virusnega hepatitisa C pri bolnikih z latentnimi oblikami bolezni.
- V primerih, ko ima bolnik protitelesa proti virusu hepatitisa C, toda ni potrjena s PCR diagnostiko.
- Da bi ocenili učinkovitost zdravljenja in potrdili dejstvo, da je okrevanje učinkovito.
- Kot presejalna tehnika za zgodnje odkrivanje bolezni pri ljudeh v populaciji.
Praviloma se za raziskovanje uporablja venska krv pacienta. Občutljivost ultra-metoda je manjša od 10 IU / l, kar je večkrat višje od standardnih kvantitativnih in kvalitativnih variant PCR diagnostike. Imenovanje ultra PCR opravi zdravnik za nalezljive bolezni ali hepatolog.
Odločilna faza diagnoze in vrednotenja zdravljenja je pravilna interpretacija rezultatov, dobljenih z ultra-PCR metodo. Vedno je treba spomniti, da je malo možnosti, da bi dobili lažne negativne in lažne pozitivne rezultate.
Za odpravo takšnih situacij je treba izključiti kontaminacijo vzorcev krvi in laboratorijskih materialov. Z uporabo ultrazvočnih PCR se je mogoče izogniti situacijam, ki vodijo v lažne negativne rezultate in s tem otežijo diagnozo.