ELISA za virusni hepatitis

Share Tweet Pin it

Pustite komentar 2,929

Za odkrivanje virusnega hepatitisa v telesu zdravilo široko uporablja metodo imunskega testa encimov, ki temelji na odkrivanju koncentracije in tipa antigenov s protitelesi in encimi. Postopoma se izvaja z laboratorijskimi raziskavami z visoko natančnostjo indikacij. Glede na količino in razred protiteles se spremeni barva in koncentracija encima, ki uporablja ELISA, in glede na to zdravnik diagnozi bolezen.

Kaj je EIA?

Prisotnost virusnega hepatitisa v bolnikovo telo določimo z uporabo seroloških metodo analize krvi na prisotnost virusa HCV in markerjev (telesa in protitelesa), kar kaže na to. Povezane imunski test (ELISA) raziskuje različne viruse, majhne molekule, makromolekule, njihove kvalitativne in kvantitativne kazalnike, z ekspresijo reakcijo na svojih antigenov. Za to je encim uporabljen kot znak za registracijo signala. Vse bolj uporablja v medicini, saj ELISA očitno natančno definirane antigene, ne da bi jih mešanje z drugimi, ima visoko občutljivost na prisotnost okužbe z virusnega hepatitisa.

Analizo je treba navesti na prazen želodec.

Minus takšne diagnoze je nezmožnost razkriti vzrok bolezni, saj metoda kaže samo reakcijo imunskega sistema telesa. Na rezultate analize vplivajo predhodno cepljenje. 8 ur pred analizo priporočamo, da se vzdržijo prehrane, nikotina, alkohola. Osnova ELISA testa je encimski in imunski odziv organizma na virus. Biološke molekule se vežejo na celico in njene elemente, mikroorganizme, odkrijejo virus, nato delujejo encimi, ki omogočajo izražanje imunskega odziva v vidnem in merljivem parametru.

Indikacije za analizo

Virusni hepatitis v telesu lahko povzroči cirozo jeter in jeter. Pomembnost pravočasne diagnoze je nesporna. Primarna metoda diagnoze je test ELISA, ki natančno določa prisotnost virusa HCV (IgM in IgG) in aktivnost njegovih elementov v sledovih. Brez uspeha so predloženi testi za virusni hepatitis:

  1. Ljudje iz tveganih skupin (odvisniki od drog, bolniki s AIDS-om, zdravstveno osebje in organi pregona).
  2. Ljudje z akutno ali kronično obliko hepatitisa.
  3. Nosečnice in načrtovanje nosečnic.

ELISA prepoznava bolezen v kateri koli fazi. Rezultati analize so v povprečju pripravljeni 2 dni.

Merila, ki določajo pomen analize

Preskus ELISA določa prisotnost protiteles IgG, IgM, IgA. Pri diagnosticiranju virusnega hepatitisa zdravnik ne posveča pozornosti njihovemu tipu, saj prisotnost takšne manifestacije virusa HCV že kaže na akutno ali kronično stopnjo bolezni. V zgodnjih fazah bolezni se raven IgM zveča (5 dni po okužbi); Protitelesa IgG se pojavita 15-20 dni in so lahko v človeški krvi dolgo časa tudi po zdravljenju; IgA se pojavi po 10-14 dneh, po zdravljenju se zmanjša.

V primeru odkritja IgG in IgA po uporabi zdravil in njihova raven ostane v istem indeksu - nosilec ima kronično obliko hepatitisa. Pomembno merilo za test bo jasna opredelitev razreda protiteles in njihovo število. Na podlagi tega je mogoče poznati ne samo prisotnost bolezni, ampak tudi stopnjo njegovega razvoja. Odkrivanje takšnih elementov v pacientovi krvi omogoča predpisovanje pravilnega in pravočasnega zdravljenja za preprečevanje resnejših posledic.

Kako se izvaja?

Izolirajte neposreden in neposreden ELISA test. Faze neposrednega:

  1. Zbiranje biološkega materiala in dajanje v posebne vodnjake.
  2. V 15-30 minutah. antigeni pripisujejo površini vodnjakov.
  3. Dodajanje protiteles v vdolbinice do najdenega antigena. Pustite vse za 1-5 ur.
  4. Odstranitev nepritrjenih antigenov (izliv vsebine vdolbinic).
  5. Raztopine sperite s posebno raztopino.
  6. Dodajte encimsko raztopino v vodnjake. Pustite 30 minut do 1 ure.
  7. Uporabite kolorimetrijo (razkrivajte barvo in koncentracijo barve vsebine vdolbinice, primerjavo s kazalniki, ki so neposredno sorazmerni s koncentracijo virusa).
Uporaba za diagnozo posredne metode ELISA bo dala natančnejši rezultat.

Indirektno ELISA metodo izvajamo z uporabo neoznačenih protiteles proti odkritim antigenom in nato dodamo k njim označene. Prvič, od pacienta je vzeta kri in je na luknjah prenašala 15-30 minut. (protitelesa so fiksirana z vdolbinicami). Nato se v njih pojavijo neoznačena protitelesa za 1-5 ur (nastanejo povezava protiteles z antigeni - imunski kompleks). Nadalje iz vdolbinic ne vlijemo elementov v sledovih in jih opere s posebno raztopino. V naslednji fazi laboratorijski asistent dodaja mikrohranila v vodnjake 15-30 minut. (v tem primeru niso označeni z oznako za tvorbo kompleksa protitelesa-protitelo-antigen). Odstranjevanje presežka (ohlapno), ko se izpraznite in sperete z raztopino, ponovno odstranite. Nato se uvede encim, ki spremeni barvo v 5 do 30 minutah. ostanejo v luknjah in barvni podatki se preverjajo glede na podatke kazalnikov tabele. Metoda posredne EIA je natančnejša.

Kaj kaže ELISA v analizi za virusni hepatitis?

Testom pokaže prisotnost okužbe (hepatitis virusov vseh vrst, HIV, herpesa, sifilisom, citomegalovirus, ošpicam, rdečkam, virus mumpsa, virusa Epstein-Barr), ki je označevalec avtoimunskih bolezni, rakave celice. Prikazuje, razmnoževanja poškodbe sistema (sprememba ravni testosterona, prolaktin, estradiol in progesteron), nepravilno delovanje ščitnice, vdor helmintov, klamidija. Učinkovit je za odkrivanje ureaplazmoze, velikega kašlja, Dangejevega virusa, virusa West Nile, Borrelia. Seznam opredelitev je visok, vsebuje veliko naslovov.

Potrditev rezultatov

Določitev HCV antigena po ELISA metodi daje 98% natančnost. Uporablja se tudi za ponavljajoče testiranje biološkega materiala z mehkimi predhodnimi indeksi. Prisotnost antigenov IgM ni pokazatelj akutne oblike hepatitisa in zahteva dodatne raziskave. Pri ponovnem izvajanju IFA rezultati testov sovpadajo s 90-100%. V primeru minimalnega odstopanja se kot indikator vzame povprečna vrednost. Za doseganje maksimalne natančnosti v indikatorjih je treba zdravnikom svetovati vzporedno z biokemičnim testom krvi. Za preverjanje rezultatov po imunskem testu encimov lahko uporabimo druge diagnostične metode.

EIA za hepatitis C

IFA hepatitis C učinkovito določa, to je eden od metod diagnosticiranja bolezni, ki temelji na interakciji s antigeni in protitelesi. Imunokemična reakcija s pomočjo ELISA (encimski imunski test) omogoča odkrivanje protiteles proti HCV v telesu. Metoda omogoča diagnosticiranje človeškega hepatitisa C diferencialno, za določitev stopnje razvoja bolezni, za napovedovanje njegovega poteka. Odkrivanje posebnih seroloških markerjev omogoča tudi izbiro učinkovitega protivirusnega zdravljenja patologije.

Značilnosti metode

Analizo za odkrivanje protiteles proti virusu hepatitisa tipa C v človeški krvi opravimo z nalaganjem tujega mikroorganizma (antigena) v molekulo imunoglobulina. Vezani encimski encim ima vlogo posebne znamke. Omogoča, da sledi imunokemijski reakciji, pa tudi eno od njegovih komponent.

Kot sestavine encimskega imunološkega testa lahko delujejo:

  • protitelesa;
  • protitelesa, označena s posebnim encimom;
  • antigeni;
  • substrati encimov;
  • indikatorske barve.

Ko tuji škodljivi mikroorganizmi vstopijo v človeško telo, zaščitne sile začenjajo proizvajati imunoglobuline (protitelesa). Nato delujejo na antigene in jih nevtralizirajo. Takšna interakcija vodi v nastanek protitelesnega antigena, ki ima kazalnike količine in kakovosti. Navedejo prisotnost ali odsotnost okužbe s HCV v telesu. Če je rezultat encimskega imunološkega testa pozitiven, se pojavi virus hepatitisa tipa C.

Sodobne tehnologije v medicini lahko znatno skrajšajo časovni okvir za odkrivanje virusa hepatitisa, ki se pojavi v akutni obliki. Zahvaljujoč diagnostičnim sistemom tretje generacije se tudi zdi mogoče povečati specifičnost in občutljivost imunokemične reakcije.

Glavni študijski material za IFA je venska kri (vključno s krvjo dajalca). Glede na indikacije se lahko odvzame cerebrospinalna tekočina ali amnijska tekočina.

Pozitiven rezultat metode ELISA za hepatitis tipa C ne kaže vedno prisotnosti virusne infekcije v telesu. V več kot 35% primerov v krvi ni antigenov virusa, kar vodi k lažnemu pozitivnemu rezultatu.

Metoda vam omogoča spremljanje kvantitativnih in kvalitativnih sprememb, ki razlikujejo akutne in kronične oblike hepatitisa C. Vendar pa je za ugotavljanje aktivnosti patološkega procesa neučinkovito. Da bi natančneje potrdili prisotnost okužbe s HCV, je treba uporabiti tudi druge metode diagnosticiranja patologije.

Indikacije za EIA

Metoda odkrivanja vrste in količinske koncentracije tujih mikroorganizmov (antigenov) s pomočjo imunoglobulinov in encimov izvajamo v več fazah. Na podlagi spremembe barve in kvantitativnega indeksa encima lahko zdravnik diagnosticira osebo s hepatitisom tipa C.

Naslednje kategorije ljudi bodo verjetneje padle:

  1. Bolniki, ki so bili podvrženi operaciji, ter bolezni notranjih organov in sistemov.
  2. Okuženi s HIV (okuženi z virusom humane imunske pomanjkljivosti). Velik odstotek ljudi v tej skupini so odvisniki od drog.
  3. Zdravstveni delavci.
  4. Uradniki policije.
  5. Noseče ženske.

Hepatitis virusnega izvora pogosto vodi do razvoja raka (na primer raka jeter). Zato je za darovanje krvi v encimsko imunskim testom najprej ljudi, ki vstopajo glavno skupino tveganj, in bolniki z akutnim ali kroničnim hepatitisom.

Glede na indikacije lahko zdravnik ELISA predpiše pacientom z diagnozo:

  • SPI (okužbe, ki se prenašajo po spolni poti);
  • bolezni virusnega izvora (papiloma virus, herpetična okužba, hepatitis itd.);
  • alergijska narava patologije;
  • status imunske pomanjkljivosti;
  • onkologija.

Prednosti in slabosti

IFA hepatitis C se lahko odkrije v zgodnji fazi, pa tudi v asimptomatskih in žolčnih oblikah. Kot vsaka diagnostična metoda ima številne prednosti in slabosti.

Med pozitivnimi značilnostmi ELISA strokovnjaki opredeljujejo:

  1. Točnost kvalitativnih in količinskih kazalnikov. Občutljivost metode presega druge študije za odkrivanje hepatitisa ducat krat.
  2. Pomembno zmanjšanje časa odkrivanja virusne okužbe s sodobnimi diagnostičnimi sistemi.
  3. Nizka cena v primerjavi z drugimi študijami o odkrivanju hepatitisa pri ljudeh.
  4. Možnost diagnosticiranja bolezni jeter v zgodnji fazi brez hudih simptomov.
  5. Korak po korakih z uporabo avtomatiziranih procesov.

Kljub visoki natančnosti ELISA, več kot 35% primerov s pozitivnim rezultatom virusa hepatitisa pri bolniku ni zaznano. Pogosto test ne potrjuje patologije, kar kaže na sumljiv ali negativen rezultat.

Zanesljivost študije vpliva na eno ali drugo stopnjo:

  1. Sprejem zdravil.
  2. Motnje presnovnih procesov v telesu.
  3. Prisotnost nekaterih bolezni kronične narave, ki spodbujajo aktivno proizvodnjo imunoglobulinov.

Glede na pomanjkljivosti rezultatov in vitro izkušenj z metodo ELISA pacientu daje dodatne študije. Za zanesljivo odkrivanje protiteles proti okužbi z virusom hepatitisa C se uporablja PCR (verižna reakcija s polimerazo) ali RIBA (rekombinantna imunoblotting).

Kaj ugotavlja in kako se izvaja študija

Analiza z ELISA lahko razkrije širok razpon bolezni pri ljudeh.

Poleg odkrivanja protiteles hepatitisa vseh vrst lahko pozitiven rezultat testa kaže na prisotnost naslednjih patologij v telesu:

  • virus humane imunske pomanjkljivosti;
  • herpetična okužba;
  • sifilis;
  • SPI (ureaplazmoza, klamidija itd.);
  • papilomavirus;
  • citomegalovirus.

Raziskave so tudi neke vrste marker za odkrivanje malignih neoplazem, patologij genetskih, hormonskih motenj, kot tudi motnje v endokrinega sistema.

Priprava za dostavo biološkega materiala za odkrivanje virusa hepatitisa C pomeni zavrnitev uporabe hrane in zdravil 12 ur pred študijem. Prav tako je predpogoj abstinenca pri pitju alkohola, maščob, ocvrtih in slanih živil.

Neposredna metoda ELISA

Glavni koraki pri neposrednem testu so naslednji:

  1. Na začetku laboratorijski delavec izvleče krv iz vene (ali drugega biološkega materiala) in jo nato položi v posebne posode.
  2. Tujci mikroorganizmi (antigeni) se jim pričakujejo v 20 minutah.
  3. Specialist dodaja imunoglobuline (protitelesa) do najdenih antigenov, da tvorijo imunski odziv. V tem primeru so komponente pustile nekaj ur.
  4. Nezadržene antigene odstranimo tako, da vsebino izlijemo iz vsebnikov.
  5. Material speremo z raztopino in nato obdelamo z encimi in pustimo eno uro.
  6. Barva in koncentracija vsebine se analizira z uporabo kolorimetrije.

Če kvantitativni indeks vsebine presega dovoljene standarde, to kaže na prisotnost virusa hepatitisa C v človeškem telesu.

Posredna metoda ELISA

To pomeni medsebojno delovanje neoznačenih imunoglobulinov z antigeni, na katere so pritrjena naknadno označena protitelesa.

Na začetku bolnik vzame kri iz vene. Potem biološki material damo v posebne posode približno pol ure. Pri teh neoznačenih protitelesih so pritrjeni na stene rezervoarjev. Nato jim dodamo označena protitelesa. Zaradi njihove interakcije nastane imunski kompleks "protitelesni antigen".

Po 4 urah se izlije vsebina posod in odstranijo nepovezane mikroelemente. Laboratorijska označeno protitelo veže na že tvori kompleks, tako da je imunski odziv "protitelo-protitelo-antigen".

Po večkratnem odstranjevanju raztopljenih mikrohranil se v posodo doda poseben encim, ki spreminja barvo in količinske indekse vsebine. Na podlagi pridobljenega rezultata strokovnjak preveri podatke in zaključi.

Pojasnilo rezultatov

Pri izvedbi ELISA se pozornost nameni prisotnosti ali odsotnosti protiteles IgA, IgG in IgM razredov. Kvantitativne indekse teh protiteles primerjamo s podatki posebne tabele.

Po njenem mnenju je razlaga rezultatov naslednja:

  1. Če niso določeni vsi trije tipi kazalnikov, se oseba popolnoma povrne.
  2. S hkratnim pozitivnim rezultatom za vse tri indikatorje opazimo akutno obliko virusne okužbe.
  3. Če se določijo protitelesa IgG razreda, pri preostalih razredih pa niso odkrili, je oseba razvila postinfekcijsko imunost.
  4. Kronični značaj bolezni označujejo pozitivni indeksi protiteles IgG in IgA razredov. Vendar pa ostanejo nespremenjene tudi po zdravljenju z zdravili.
  5. S pozitivnim odkrivanjem vseh treh vrst protiteles lahko pride do recidiva kronične narave hepatitisa.

Po statističnih podatkih se raven IgM prične dvigovati čez nekaj dni po vstopu v telo, kar kaže na zgodnjo stopnjo patologije. Protitelesa IgG se navadno pojavita 2 tedna po pojavu bolezni in sta v krvi dolgo časa (tudi po okrevanju). Protitelesa IgA se odkrijejo po dveh tednih, medtem ko se po terapiji z zdravili njihova koncentracija v telesu zmanjša.

Ne pozabite, da pozitivna hepatitisa C ELISA ne kaže vedno okužbe. Pogosto se test šteje za napačno pozitivno, kar zahteva ponovno dajanje krvi. V nekaterih primerih je bolniku dodeljena dodatna študija za natančnejše določanje krvnih preiskav.

Glavno merilo za preskus je natančna določitev količinskih in tipičnih kazalnikov. Ti vam omogočajo, da ugotovite ne le prisotnost virusa, temveč tudi obliko bolezni. Diagnoza hepatitisa C s pomočjo sodobnih metod bo omogočila pravočasno zdravljenje in zmanjšanje negativnih posledic.

Raziskave o virusu hepatitisa C

Protitelesa proti virusu hepatitisa C (skupaj)

Protitelesa proti virusu hepatitisa C v serumu so običajno odsotne
Celotna protitelesa proti virusu hepatitisa C so protitelesa razredov IgM in IgG, usmerjenih v kompleks strukturnih in nestrukturnih proteinov virusa hepatitisa C.
Ta študija je pregledana za ugotavljanje bolnikov s FAR. Celotna protitelesa proti virusu hepatitisa C se lahko odkrijejo v prvih dveh tednih po bolezni, njihova prisotnost pa kaže na možno okužbo z virusom ali prenosom okužbe.

Nedvoumen odgovor, ki temelji na rezultatih tega preskusa, ni mogoče pridobiti, ker preskus določa celotna protitelesa IgM in IgG. Če se ta zgodnjem obdobju akutnega virusnega hepatitisa C, kar dokazuje protiteles IgM, in če je to obdobje okrevanja ali stanja po trpijo HCV, potem to kaže IgG protiteles.

Protitelesa IgG proti HCV lahko v krvi obnavljajo 8-10 let s postopnim zmanjšanjem koncentracije. Morda kasneje odkrivanje protiteles leto ali več po okužbi. Pri kroničnem hepatitisu C se popolna protitelesa določijo neprekinjeno. Zato je za razjasnitev časa okužbe potrebno ločeno določiti protitelesa IgM razreda HCV.

Ocena rezultatov raziskav

Rezultat raziskave je kakovostno izražen - pozitiven ali negativen. Negativen rezultat študije kaže na odsotnost popolnih protiteles (JgM in JgG) na HCV v serumu. Pozitivni rezultati - odkrivanje celotnega protitelesa (JgM in JGG) HCV kaže začetni fazi akutnega virusnega hepatitisa, akutnega obdobju infekcije zgodnjih fazah okrevanja, virusni hepatitis C ali kroničnega virusnega hepatitisa C.

Vendar odkrivanje celotnih protiteles proti HCV ni dovolj za diagnosticiranje HCV in zahteva potrditev, da se izključi lažno pozitivno rezultat testa. Zato, kadar je v laboratoriju pridobljen pozitivni presejalni test za celotna protitelesa proti HCV, se opravi potrditveni test. Končni rezultat določanja celotnih protiteles proti HCV je podan skupaj z rezultatom potrditvenega testa.

Protitelesa proti virusu hepatitisa C JgM

Protitelesa proti virusu hepatitisa C JgM v serumu so običajno odsotne. Prisotnost protiteles razreda JgM proti HCV v pacientovi krvi omogoča preverjanje aktivne okužbe. Protitelesa razreda JgM se lahko odkrijejo ne le z akutnim HCV, temveč tudi s kroničnim hepatitisom C.

JgM razreda protiteles proti HCV pojavi v krvi pacientov 2 tedna po razvoju klinične slike akutnega virusnega hepatitisa C ali poslabšanje kroničnega hepatitisa in običajno izginejo po 4-6 mesecih. Zmanjšanje njihove ravni lahko kaže na učinkovitost zdravljenja z zdravili.

Ocena rezultatov raziskav

Rezultat raziskave je kakovostno izražen - pozitiven ali negativen. Negativen rezultat študije kaže, da v serumu ni prisotnih JgM protiteles proti HCV. Pozitivni rezultati - odkrivanje protiteles proti HCV JgM kaže začetni fazi akutnega virusnega hepatitisa, akutnega obdobju infekcije zgodnjih fazah predelave ali aktivne kroničnega virusnega hepatitisa C.

Odkrivanje virusa hepatitisa C po metodi PCR (kvalitativno)

Virus hepatitisa C v krvi navadno ni prisoten.
Za razliko od seroloških metod za diagnozo HCV, kjer se odkrijejo protitelesa proti HCV, lahko PCR odkrije prisotnost HCV RNA neposredno v krvi tako kvalitativno kot kvantitativno. Detektabilni fragment v obeh je ohranjena regija genoma hepatitisa C.

Odkrivanje protiteles proti HCV samo potrjuje dejstvo, okuženih pacientov, vendar ne dopušča, da presodijo aktivnost infekcij (replikacije virusa), prognozo bolezni. Poleg tega, protitelesa proti virusu HS odkrili v krvi bolnikov z akutnim in kroničnim hepatitisom, kot tudi pri tistih bolnikih, ki so bolni in vrniti, vendar pogosto protitelesa pojavijo v krvi le nekaj mesecev po nastopu kliničnih znakov bolezni, zaradi česar je težko diagnosticirati. Odkrivanje virusa v krvi z metodo PCR je bolj informativna diagnostična metoda.

Kvalitativno odkrivanje HCV s PCR v krvi priča o viremiji, omogoča presojo reprodukcije virusa v telesu in je eno od meril za učinkovitost protivirusnega zdravljenja.

Analitična občutljivost metode PCR ni manjša od 50-100 virusnih delcev v 5 ul sondo potekala dodeljevanja DNA, specifičnost - 98%. Detekcija HCV RNA s PCR v zgodnjih fazah virusne okužbe (po možnosti v 1-2 tednih po okužbi) zaradi skupnega odsotnosti seroloških označevalcev lahko služijo kot prvi dokaz okužbe.

Vendar izolirano odkrivanje RNA virusa hepatitisa C v ozadju popolne odsotnosti drugih seroloških markerjev ne more popolnoma odpraviti lažno pozitivnega rezultata PCR. V takih primerih je potrebna celovita ocena kliničnih, biokemičnih in morfoloških študij in ponovljena ponavljajoča se potrditev prisotnosti okužbe s PCR.

Po priporočilih Svetovne zdravstvene organizacije za potrditev diagnoze virusnega hepatitisa C je nujna trojna detekcija RNA virusa hepatitisa C v bolnikovi krvi.

Detekcija HCV RNA z metodo PCR se uporablja za:

  • reševanje vprašljivih rezultatov seroloških študij;
  • diferenciacijo hepatitisa C iz drugih oblik hepatitisa;
  • odkrivanje akutne faze bolezni v primerjavi s prenosom okužbe ali stika; določanje faze okužbe novorojenčkov iz seropozitivnih za virus materničnega vratu hepatitisa C;
  • spremljanje učinkovitosti protivirusnega zdravljenja.
  • Odkrivanje virusa hepatitisa C po metodi PCR (kvantitativno)

    Kvantitativna metoda za določanje vsebnosti RNK virusa hepatitisa C v krvi vsebuje pomembne informacije o intenzivnosti bolezni, učinkovitosti zdravljenja in razvoju odpornosti na protivirusna zdravila. Analitična občutljivost metode je od 5.102 kopij / ml virusnih delcev v krvnem serumu, specifičnost je 98%.

    Raven viremije se ovrednoti takole: kadar vsebnost HCV RNA od 10 ^ 2 do 10 ^ 4 kopij / ml - nizka; od 10 ^ 5 do 10 ^ 7 kopij / ml - srednja in nad 10 ^ 8 kopij / ml - visoka.

    Kvantitativno določanje HCV RNA v krvnem serumu s PCR je pomembno za napovedovanje učinkovitosti zdravljenja z interferonom-alfa. Dokazano je, da imajo osebe z nizko stopnjo viremije najugodnejšo prognozo bolezni in največjo verjetnost pozitivnega odziva na protivirusno zdravljenje. Z učinkovitim zdravljenjem se raven viremije zmanjša.

    Genotipizacija virusa hepatitisa C - določanje genotipa

    Metoda PCR omogoča ne le odkrivanje RNA HCV v krvi, temveč tudi ugotavljanje njegovega genotipa. Najpomembnejše za klinično prakso so 5 podtipov HCV-1a, 1b, 2a, 2b in 3a. V naši državi je najpogostejši podtip 1b, nato pa 3a, 1a, 2a.

    Določanje genotipa (podtipa) virusa je pomembna za prognozo HCV in izbire bolnikih s kronično HCV za izvajanje zdravljenje z interferonom alfa in ribavirinom.

    Ko okuženi bolnik kronične HCV podtipa 1b razvije pri okoli 90% primerov, če podtipov 2a in 3a - v 33-50%. Bolniki z podtipa 1b bolezen bolj huda in se pogosto konča z razvojem cirozo jeter in karcinomom jetrnih celic. Ko okužene z podtipa 3a je bolj izrazit pri bolnikih s steatoze, biliarnega trakta lezijo, ALT aktivnosti in milejših fibrozne spremembe v jetrih, kot pri bolnikih z podtipa 1b.

    Indikacije za zdravljenje kroničnega HCV interferona-alfa so:

  • povečana raven transaminaz;
  • prisotnost HCV RNA v krvi;
  • genotip 1 HCV;
  • visoka raven viremije v krvi;
  • histološke spremembe v jetrih: fibroza, zmerni ali hudi vnetni pojavi.
  • Pri zdravljenju bolnikov z interferonom alfa z virusnim hepatitisom C s podtipom 1b je učinkovitost zdravljenja v povprečju opazovana v 18% primerov, pri okuženih z drugimi podtipi - v 55%. Uporaba kombiniranega režima zdravljenja (interferon-alfa + ribavirin) poveča učinkovitost zdravljenja. Pri 28% bolnikov s podtipom 1b in 66% pri drugih podtipih HCV so opazili močan odziv.

    ELISA metoda pri odkrivanju hepatitisa

    Sodobna medicina pozna veliko bolezni jeter. Med najpogostejšimi in nevarnimi je HCV (virusni hepatitis C), saj se ta okužba pogosto razvija asimptomatično in povzroča kritične zaplete, do smrtonosnega izida. Zato je bistvenega pomena, da se pravočasno diagnozo izvedemo z različnimi boleznimi metod, vključno z encimskim imunotestom (EIA) za odkrivanje protiteles v krvi proti virusom.

    Okužba s HCV za diagnozo hepatitisa

    V laboratorijski diagnostiki se za odkrivanje hepatitisa C (okužba s HCV) uporabljajo dve vrsti metod:

    1. Serološki temelji na odkrivanje protiteles proti virusu hepatitisa C (anti-HCV), ki se imenuje tudi ELISA (encimski imunski test). Namenjen je odkrivanje anti-HCV (IgM in IgG označevalci) se uporablja za presejanje in diagnosticiranje hepatitisa C. Obe označevalcev lahko zaznana v krvi (plazmi) v različnih kombinacijah, ki zahteva pravilno klinično razlago. Za potrditev prisotnosti anti-HCV se opravi test RIBA (rekombinantni imunoblot).
    2. Molekularno-biološka, ​​namenjena odkrivanju virusa RNA. Preskus HCV RNA je dodeljen naslednjim skupinam bolnikov:
      • z ugotovljenim anti-HCV;
      • brez odkritega anti-HCV, vendar z ugotovljenimi epidemiološkimi in kliničnimi podatki, ki zahtevajo odpravo akutnih oblik HCV.

    RNA virusa je mogoče odkriti v krvi 14 dni po okužbi, to je pred pojavom anti-HCV, ki se pojavijo v prvih 2-3 mesecih.

    Za dokončno potrditev diagnoze (še posebej, ko je odkrit le eden od dveh označevalcev okužbe s HCV) strokovnjaki priporočajo, da se po določenem času ponovijo HCV proti HCV in HCV RNA.

    Identifikacija hepatitisa z ELISA

    Za zgodnjo diagnozo virusnega hepatitisa, zlasti asimptomatski, anicteric oblik seruma odkrivanja prisotnosti virusnih proteinov (antigeni) ali protiteles vanj (pridobljen s imunskega sistema med penetracijo v virusov body) z encimskim imunotestom (EIA). To je univerzalna metoda imunološke diagnoze, njegova bistvo je proučiti interakcijo "antigen-protitelesa". Uporablja se v mnogih državah sveta.

    Določitev HCV ELISA omogoča ne le natančno diagnozo, temveč tudi za oceno narave bolezni, kot tudi izberete pristojni in učinkovito zdravljenje z običajnimi zdravili (interferon, ribavirina), drog neposredne tožbe (sofosbuvir, Daklatasvir) in njihovo generično Indiji in na Kitajskem.

    Če je mogoče, diagnozo virusnega hepatitisa z ELISA dopolnjuje PCR (verižna reakcija), ki omogoča ugotavljanje prisotnosti virusov hepatitisa v krvi RNA.

    Kako natančna je metoda imunskega testa encimov

    Ocenjuje se, da je točnost metode ELISA 95%, tj lahko detektiramo 95 od 100 bolnikov z imunskim testom v prisotnosti krvi in ​​količine protiteles proti HCV - IgM in IgG. Če je rezultat pozitiven, je lahko diagnosticiran kontakt HCV z organizmom (ne samo virus, temveč prisotnost protiteles proti njemu v krvi, ki je lahko posledica že prenesene bolezni).

    Kljub visoki občutljivosti encimskim imunotestom (EIA), ni mogoče zaznati 40% bolnikov z virusom pozitiven rezultat, ki kaže vprašljivo, ali lažno pozitivne rezultate.

    Da bi potrdili pravilnost rezultatov ELISA, se RIBA (rekombinantna imunoblottinga) uporablja za bolj natančno proučevanje odkrivanja protiteles proti HCV.

    Preizkusni test HCV

    Učinkovite študije za ugotavljanje prisotnosti protiteles proti virusom hepatitisa vključujejo jedro proti HCV, ki se uporablja kot potrditveni test pri pridobivanju "negotovih" rezultatov.

    Če se sredstvo proti HCV odkrije v serumu v krvi pri razredčitvi 1: 1000, je zelo verjetno, da se lahko diagnosticira pozitiven rezultat, kar pomeni, da je bolezen prisotna.

    Če so vzorci pri razredčitvi 1: 1000 negativni, je pri razredčitvi 1: 200 pozitivna, je potrebna študija za prisotnost virusne RNK. V tem primeru je najverjetneje okužba s HCV.

    Pomembno je razumeti, da so pri kroničnih oblikah HCV protiteles neprenehoma, in pri odpravi (izločanja celic) virusa traja 4-8 let ali več. Ker je prisotnost anti-HCV ni vedno pokazatelj okužbe z organizmom, in ne omogoča objektivne zaključke o delovanju protsessa.Dlya dobiti točnih podatkov o virusni obremenitvi, stopnjo poškodbe jeter, trajanje infekcije in razlike akutnih in kroničnih oblik bolezni je priporočljivo uporabiti definicijo spektra protiteles proti drugačnemu HCV peptidi. Prav tako je pomembno upoštevati njihovo količinsko in kvalitativno dinamiko.

    Raziskave o virusnem hepatitisu z uporabo metode If

    ELISA pri diagnozi virusnega hepatitisa. Možnosti encimskega imunološkega testiranja

    Posebno laboratorijska diagnostika viralnega hepatitisa temelji na uporabi imunokemičnih in molekularnih bioloških metod raziskav. Glavne imunokemijske metode so radioizotop ali radioimunsko testiranje (RIA) in imunoenzimaticna (ELISA). Osnova imunokemičnih metod diagnoze je specifična interakcija antigen-protitelesa z naknadnim odkrivanjem kompleksa s pomočjo posebnih nalepk. Najpogostejši je imunski test encimov.

    Prva poročila o uporabi imunski test encimov. kot metodo za določanje katerih koli snovi so istočasno objavili dve raziskovalni skupini - V. Van Weemen, A. Schuurs in E. Engvall, P. Perlmann. Imunsko testirana temelji na načelu, da na trdno fazo, ki se uporablja predvsem, površina vdolbino polistirenske plošče fiksno antigena ali okužb s patogeni protitelo (pogosto zmes protiteles) do antigenov je treba odkriti. Ta antigen ali protitelesa, ki so pritrjena na trdni fazi, imenujemo imunosorbent.

    Kot rezultat inkubacije imunosorbent in testiranega seruma v prisotnosti zaznavnega sredstva, so vezani na kompleks antigena in protiteles. Po postopku pranja, v katerem se odstranijo nevezani antigeni in protitelesa, se opravi inkubacija s konjugatom. Kot konjugat pri odkrivanju HBsAg z uporabo anti-HBs, pri odkrivanju protiteles proti virusu hepatitisa C bispecifičnih protiteles za humane imunoglobuline (antispecies konjugiranih) označeni s hrenovo peroksidazo. Kot rezultat te inkubacije se antigen-protitelo dodatnega vnesenega konjugata dodaja že obstoječim kompleksom. Po odstranitvi nevezanega konjugata (pranja) v vdolbine vnesemo substrat. Pri uporabi peroksidaza konjugiramo substrat kot je vodikov peroksid uporabimo v kombinaciji z indikatorjem, kot je najpogosteje uporabljena orto-fenilendiamin (OPD) ali tetrametilbenzidina (TMB). Rezultat je fotometrično ocenjen.

    Kakovost in zanesljivost analitskega možnosti imunskega testa encimov so značilna številna merila, vključno z občutljivostjo, specifičnostjo, pravilnostjo in obnovljivostjo.

    Občutljivost - najmanjša količina snovi, ki jo je mogoče odkriti z encimskim imunskim preskusom. V tem primeru je spodnja meja občutljivosti te metode koncentracija analita v vzorcu, ki ustreza najnižji pozitiven rezultat določanja, znatno razlikujejo od znanih negativnih vzorcev. IFTS Občutljivost je odvisna od številnih okoliščin, povezanih s tako zasnovo testnega sistema (ekstrakcija kakovosti imunski afiniteto in varovalni sistemi), kot tudi metodo za registracijo resolucije in točnosti.

    Specifičnost - sposobnost natančno identificirati komponente, za katere je namenjen ta encimski sistem imunološke preizkusa. Specifičnost ELISA veliki meri odvisna od navzkrižne reakcije protiteles ali antigenov (to, sestavki, ki se uporabljajo kot imunski) do tesno sorodne spojine, kot tudi sestave inkubacijski medij (matriks efekta) v.

    Pravilnost - skladnost povprečne vrednosti rezultatov ponavljajočih se določitev istega kontrolnega vzorca z dejansko vrednostjo izmerjenega parametra. Pravilnost določanja v ELISA je odvisna od kakovosti samega testnega sistema in kontrolnega vzorca. Za dobre encimsko povezane imunološke sisteme so indeksi korektnosti v območju od 90-110%. Posebna značilnost medicinskih in bioloških raziskav v zdravilu ELISA je nemogoče določiti natančno vrednost, zato je prava vrednost vzeta iz povprečja več strokovnih laboratorijev. Statistično merilo pravilnosti je aritmetična sredina in stopnja njenega odstopanja od prave vrednosti, izražena v odstotkih.

    Ponovljivost - zmožnost preskusnega sistema, da pri istih vzorcih ponovi iste vrednosti. Ponovljivost je odvisna tako od naključnih napak (napak) v postopku za nastavitev reakcije kot od kakovosti preskusnih sistemov in točnosti metode zapisovanja rezultatov. Menimo, da ponovljivost istih kontrolnih vzorcev enega podjetja v različnih laboratorijih ne sme preseči vrednosti koeficienta variacije 15%.

    Obstaja več posebnih shem ELISA za določanje markerjev virusnega hepatitisa: a) neposredna imunoenzimična analiza; b) posredni imunološki preskus; c) konkurenčno zaviranje; c) metoda "zajetje" ali "zajemanje".

    Iz molekularnih bioloških metod diagnoza viralnega hepatitisa pogosteje uporabljene polimerazne verižne reakcije in hibridizacija. Te metode, še posebej PCR, omogočajo odkrivanje zelo majhnih količin specifične virusne DNA ali RNK in s tem presojanje replikacije in v nekaterih primerih tudi replikacijske aktivnosti.

    Krvni test za hepatitis C

    Hepatitis C je ena najpogostejših bolezni jeter, ki se pojavi, ko se okuži z virusom hepatitisa C (HCV), ki prodre v telo predvsem v stiku s krvjo okužene osebe. Ustreza kronične in akutne hepatitis v 70-80 odstotkih bolnikov z akutnim hepatitisom C nimajo simptomov bolezni, v nekaterih primerih pa šele čez nekaj časa, ko se okužba manifestacije bolezni, ki so izražene v utrujenost, bolečine v trebuhu, izguba apetita, temno urin, bruhanje, slabost, čiščenje blata, zlatenica, bolečine v sklepih. Običajno se simptomi pojavijo 6-7 tednov po okužbi, vendar se trajanje znakov bolezni spreminja od 2 tednov do šestih mesecev. Če pride do zgoraj naštetih simptomov, je treba obiskati zdravnika, nalezljivih bolezni, in krvni test za hepatitis C. hepatitisa Diagnoza izveden pravočasno, lahko odkrivanje bolezni v zgodnji fazi in znatno povečajo možnosti za okrevanje.

    Ko se opravi analiza o hepatitisu C

    Primeri, kjer je analiza o hepatitisu C obvezna:

    • med nosečnostjo in načrtovanjem družine;
    • bolniki s simptomi kroničnega ali akutnega hepatitisa;
    • ljudje so ogroženi. To so zdravstveni delavci, ljudje v zaporu, policisti, ljudje, ki uporabljajo droge, imajo veliko spolnih partnerjev, trpijo zaradi AIDS-a, na hemodializi in drugi.

    Priprava na analizo za hepatitis C

    Posebna priprava za analizo za hepatitis C ni potrebna. Za analizo se krvi vzamejo iz žil na prazen želodec, pri čemer zadnji obrok traja najmanj osem ur.

    Analize ELISA za hepatitis C

    Prva analiza, ki je običajno predpisana za diagnozo testa hepatitisa C - ELISA (encimski imunski test). Analize ELISA za hepatitis C omogočajo odkrivanje prisotnosti protiteles proti virusu hepatitisa C (anti-HCVAb) v krvi. Če je rezultat testa ELISA pozitiven, to kaže na prisotnost stika telesa z virusom hepatitisa C. Toda pri 40 odstotkih ljudi, ki imajo pozitivno ELISA, virusni test ni v krvi. Ta pojav se imenuje lažno pozitiven rezultat. Tudi s pomočjo ELISA bo preverjena donorska kri.

    Analize RIBA za hepatitis C

    Za potrditev pozitivnega rezultata ELISA se uporablja analiza RIBA za hepatitis C. Postopek rekombinantni imunoblot (riba) je bolj natančen študija prisotnost protiteles za prisotnost virusa hepatitisa C v telesu virus hepatitisa C pozitivnega rezultata te analize tudi določa le potrjuje prisotnost protiteles.

    PCR analiza za hepatitis C

    Za odkrivanje prisotnosti virusov hepatitisa C (RNA HCV) v krvi in ​​diagnosticiranja je najpogosteje uporabljena analiza verižne reakcije s polimerazo (PCR). V tej študiji je mogoče z natančnostjo zaznati prisotnost v krvi celo majhne količine virusa. Analiza PCR za hepatitis C lahko odkrije prisotnost virusa že 5 dni po okužbi, veliko pred pojavom protiteles. Ko je rezultat analize PCR pozitiven, to pomeni, da obstaja aktivna okužba.

    Takšne razlike v PCR analizi so:

    • kvantitativni PCR, ki omogoča ugotavljanje ne le dejstva prisotnosti virusa, temveč tudi virusne obremenitve (količine virusa). Ta pokazatelj je zelo pomemben za določanje učinkovitosti zdravljenja;
    • genotipizacija, ki določa genotip virusa hepatitisa C, kar je pomembno za določanje trajanja in taktike zdravljenja. Virus hepatitisa C vsebuje več kot 10 genotipov, vendar je za klinično prakso dovolj, da določimo pet najpogostejših vrst: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

    Izvede se kvantitativna analiza PCR:

    • s kvalitativnim pozitivnim testom prisotnosti v serumu RNK virusa hepatitisa C;
    • za natančno oceno učinkovitosti zdravljenja;
    • določiti taktiko zdravljenja bolnika.

    Ni neposredne povezave med resnostjo hepatitisa C in količino virusa v krvi. Koncentracija virusa vpliva na nalezljivost bolezni, to pomeni, da je količina virusa v bolnikovi krvi večja, večja je nevarnost prenosa virusa, na primer med spolnim stikom ali od matere do otroka. Tudi učinkovitost zdravljenja je odvisna od koncentracije virusa. Ko se izvaja terapija, je ugoden dejavnik nizka virusna obremenitev in zelo visoka - neugodna.

    Izvede se analiza genotipizacije:

    • s kvalitativnim pozitivnim testom prisotnosti v serumu RNK virusa hepatitisa C;
    • za natančno oceno učinkovitosti zdravljenja;
    • določiti taktiko zdravljenja bolnikov;
    • za napovedovanje kronične okužbe;
    • za določitev napredovanja bolezni.

    Odkrivanje genotipa virusa je zelo pomembno za določanje trajanja zdravljenja, kar je pomembno, saj ima interferon širok spekter neželenih učinkov in nizka toleranca za bolnike.

    Razlaga analize za hepatitis C

    Običajno je RNA virusa, protiteles proti njim in antigeni popolnoma odsotni. Prisotnost protiteles v krvi kaže prisotnost kroničnega ali akutnega hepatitisa C ali obdobje okrevanja. Če kri vsebuje HCV RNA, ki je določena s PCR analizo, to kaže na prisotnost virusa v krvi.

    Če je raziskovalna tehnika napačna, je prenos in odvzem krvi nenormalen, analiza PCR lahko včasih kaže lažno pozitiven rezultat. Analize ELISA in RIBA v zgodnjih fazah bolezni, kadar telo še ni proizvedlo dovolj protiteles, lahko prikaže lažno negativen rezultat.

    Če se pri dešifriranju analize za hepatitis C dosežejo pozitivni rezultati, je za nadaljnjo diagnozo in zdravljenje potrebno posvetovati z zdravnikom nalezljive bolezni in gastroenterologom.

    Segmentirani nevtrofili so znižani

    Trombociti pri otroku - normalno, povišano, spuščeno

    Thiotrotropni hormon THT

    Diagnoza hepatitisa

    Določitev prisotnosti ene od oblik v telesu hepatitisa ne more takoj, saj lahko inkubacijsko obdobje bolezni traja do štiri tedne. Ko se pojavijo prvi znaki bolezni, se v prizadetem organizmu pojavijo radikalne spremembe v sestavi krvi: biokemijska analiza poroča o resnem zdravstvenem problemu in prisotnosti patogenega virusa. Vendar, za končno diagnozo ni dovolj za darovanje krvi za hepatitis, prav tako je potrebna podrobna diagnoza hepatitisa.

    Laboratorijska diagnoza hepatitisa

    Zaželeno je, da ga izvedete po koncu inkubacijskega obdobja, tako da lahko zdravnik z absolutno točnostjo določi jetrno bolezen, ki je prisotna v telesu. V nasprotnem primeru predpisano zdravljenje ne bo doseglo želenega terapevtskega učinka in celo poslabšalo prevladujočo klinično sliko.

    Diagnoza hepatitisa A

    Praviloma se diagnoza hepatitisa A začne s podrobnim zaslišanjem pacienta in določitvijo vrste testov, ki jih je treba izvesti čim prej. To so:

    • biokemijski test krvi;
    • popoln klinični test krvi;
    • PCR metoda;
    • EIA;
    • koagulogram.

    Če Botkinova bolezen napreduje, potem rezultati biokemičnega krvnega testa kažejo nenormalni skok bilirubina, ALAT in ASAT ter testa timola. Poleg tega se razvijejo specifični anti-HAV IgM, kar je nesporno dejstvo prisotnosti hepatitisa A.
    Pri splošni analizi krvi, zmanjšanju levkocitov določimo skok v ESR in limfocitozo. Kljub temu pa je najbolj zanesljiva metoda PCR, ki določa indikator RNK patogenega virusa.
    Poleg tega zdravnik proučuje simptome bolezni, po katerem lahko naredi končno diagnozo in nadaljuje z najučinkovitejšo terapijo. Potreba po instrumentalnem anketiranju je izjemno redka. Po uspešnem konzervativnem zdravljenju v bolnišničnih in karantenskih razmerah pacient pričakuje končno okrevanje in večkrat se hepatitis A ne ponovi.

    Diagnoza hepatitisa B

    Za ugotavljanje prisotnosti virusa hepatitisa B je mogoče pridobiti tudi laboratorijske preiskave, zato je najprej treba donirati kri za hepatitis. Patogenetski virus ima po svoji naravi tri glavne antigene - HBsAg, HBcAg in HBeAg, na katere se protitelesa proizvajajo v telesu. Glavna v tej klinični sliki je ELISA, imunski test encimov, ki določa specifične označevalce hepatitisa B.
    Takoj je treba pojasniti, da se antigen HBsAg pojavlja v krvi tudi pred prvimi simptomi hepatitisa in se zanesljivo določi v ikteričnem obdobju. Vendar negativni test ne izključuje prisotnosti hepatitisa B, zato je potrebna enako učinkovita metoda verižne reakcije s polimerazo (PCR).
    Če je sum na hepatitis obvezen biokemični test krvi, ki je priporočljivo, da preide na prvem mestu. Izvedba jetrne biopsije in ultrazvokov peritonejskih organov se obravnava posamično, toda kadar je zgodovina bolezni izredno jasna, ni potrebe po kliničnih metodah pregleda.

    Echogram jeter pri avtoimunskem hepatitisu v fazi kroničnega hepatitisa

    Diagnoza hepatitisa C

    Da bi ugotovili to diagnozo, ni dovolj darovati kri za hepatitis, saj lahko virus prevladuje v telesu v latentni obliki. Vseeno pa so osnovni laboratorijski testi vsi zgoraj predstavljeni testi ter dodatna biopsija jeter. Ta mikroskopska raziskava biološkega materiala (v našem primeru kosu jetrnih tkiv) določa obseg patološkega procesa in fibroze tkiva. Ograja materiala se izvaja v okviru lokalnega anestetika, zapleti takega postopka so v medicini zelo redki razkriti.
    Pri sumu na hepatitis C je glavna metoda kliničnega pregleda ultrazvok peritoneuma. Razlaga je preprosta: bolezen se pogosto kaže z vidno spremembo prizadete jeter, spremembe v njegovi strukturi in velikosti. Na ta način lahko določite:

    • dimenzije jeter, vranice, trebušne slinavke in žolčnika;
    • patološke spremembe teh organov;
    • stanje celotnega pretoka krvi v organih peritoneja;
    • optimalna cona za izvajanje biopsije jeter.

    Ta metoda kliničnega pregleda določa vse osrednje patologije organa na mikroskopski ravni. Če je jetra predstavljeno na sivi lestvici, je potrebna takojšnja biopsija, saj siva barva vizualizira prizadeta tkiva človeškega filtra.

    Preprečevanje hepatitisa

    Ker se bolezen ne pokaže takoj, takojšnje zdravljenje ni doseženo na vseh kliničnih slikah. Pacient lahko preprosto ne ve za obstoj patogenega virusa v telesu, ki se hitro razširi v krvni obtok in vpliva na zdrave celice jeter.
    Da bi se izognili takšni tragični usodi, je priporočljivo upoštevati vse preventivne ukrepe. Taka budnost bo znatno zmanjšala tveganje za obolevnost in rešila resne zdravstvene težave v prihodnosti. Osnovna pravila preprečevanja so predstavljena spodaj:

    • umijte roke po ulici;
    • za visoko kakovostno predelavo svežih zelenjadnic in sadja;
    • Za izvajanje vseh preventivnih cepljenj, določenih v letnem koledarskem načrtu;
    • selektivno zdravljenje spolnih partnerjev;
    • izogibajte se stiku z bolnimi;
    • Uporabljajte samo brizge za enkratno uporabo in pokažite posebno pozornost na postajah za transfuzijo krvi.

    Prav tako je priporočljivo redno darovati kri za hepatitis (enkrat na šest mesecev), da se prepričate, da virus ni prodrl v telo in ne vpliva na zdrave jetrne celice. Če se določi diagnoza, mora takoj postati dispanzer in upoštevati vsa priporočila strokovnjaka.

    Avtor publikacije:
    Syropyotov Sergej Nikolaevič
    Izobrazba: Rostovska državna medicinska univerza (RostMU), Oddelek za gastroenterologijo in endoskopijo.
    Gastroenterolog
    Doktor medicinskih znanosti

    Razlaga analize za hepatitis C

    Kakšne teste je treba narediti za to? Kakšna je njihova norma? In kateri zdravnik bo dešifriran in natančna diagnosticiranja?

    Pogoji dodeljevanja testov

    Obvezna izvedba analize za hepatitis C je norma za:

    1. Ženske v času načrtovanja in nosenja nosečnosti;
    2. Bolniki s simptomi kroničnega ali akutnega hepatitisa;
    3. Ogroženi ljudje, vključno z:
      • zdravstveni delavci;
      • policisti;
      • odvisniki od drog;
      • AIDS bolniki.

    Analize in priprava na njih

    Posebna priprava za dajanje analize za hepatitis C ni potrebna. Krvno vzorčenje se opravi na praznem želodcu od vene po vsaj 10 urah po jedi.

    Norma, ki ureja čas študija, ni večja od 2 dni.

    Analize ELISA za hepatitis C

    Prvotno dodeljen diagnosticirati analizo bolezni - je test ELISA ali encimskim imunotestom, ki pokaže prisotnost krvi in ​​količine specifičnih protiteles proti HCV v 95% primerov. Ta protitelesa so v dveh oblikah - IgM in IgG. Če je rezultat pozitiven, to kaže na prisotnost stika telesa s HCV. Vendar pa je 40% ljudi s pozitivnim virusom ELISA v krvi ni bilo mogoče najti - je dvomljivo, ali lažno pozitiven rezultat.

    Analize RIBA za hepatitis C

    Da bi potrdili pozitivne rezultate testa ELISA, z uporabo metode rekombinantne imunoblot (riba), ki je bolj natančen preiskava na prisotnost protiteles proti hepatitisu C. Vendar pa je pozitiven rezultat ne določa prisotnost HCV v bolnikovo telo, in le potrjuje prisotnost protiteles.

    PCR analiza za hepatitis C

    Analiza HCV RNA analize pogosto imenujemo verižna reakcija s polimerazo ali PCR - podrobnejši analitska metoda krvi, ki omogoča, da se neposredno zaznavanje genskega materiala HBV (vsak virus enojna delec RNA). Analiza PCR za hepatitis C razkrije pred pojavljanjem protiteles v obdobju, ki ne presega petih dni po okužbi.

    • Kvantitativni PCR, ki določa ne le dejstvo prisotnosti virusa, ampak tudi njegovo količino.
    • Genotipizacija, ki omogoča ugotavljanje genotipa virusa hepatitisa C, kar omogoča določitev, katere metode zdravljenja je treba uporabiti v vsakem posameznem primeru.

    Obstaja več kot 10 HCV genotipov, vendar je za klinično prakso dovolj, da določimo 5 najpogostejših od njih.

    Podrobneje razmislimo o količinskih in kvalitativnih analizah za HCV RNA.

    Kvalitativna analiza kaže prisotnost virusa v krvi. To je precej vprašljiva analiza, saj ima mejo občutljivosti meje. Pri izvajanju kvalitativni PCR zaželeno diagnosticira sistem, katerega stopnja je občutljivost ne manj kot 50 mednarodnih enot na ml (ie / ml). Referenčna vrednost ali norma - negativna ( "ni mogoče najti"), ki pravi, da ni našel nobenih posebnih HCV RNA fragmentov v vzorcu. Pozitiven rezultat PCR ("zaznan") označuje aktivno okužbo.

    Kvantitativna analiza PCR, ali količina virusa je test za koncentracijo virusa (viremije) v krvi, kar kaže število enot virusne RNA v določenem volumnu krvi.

    Dekodiranje kazalnikov:

    1. Več kot 800 ie / ml - norma visoke virusne obremenitve;
    2. Manj kot 800 ie / ml je norma nizke virusne obremenitve.
    3. Kvantitativno analizo PCR je treba izvesti, če:
    4. Kvalitativni test prisotnosti v serumu RNK virusa hepatitisa C ima pozitivne rezultate;
    5. Določena so taktika in ocena učinkovitosti terapije bolnika.

    Kvantitativni indeks virusa v krvi in ​​resnost bolezni nima neposredne zveze.

    • infektivnost bolezni, kar pomeni večje tveganje prenosa virusa z večjo vsebnostjo virusa v pacientovi krvi;
    • učinkovitost terapije, ki je višja, je virusna obremenitev nižja.

    Analiza genotipizacije poteka s kvalitativnim pozitivnim testom prisotnosti v serumu RNK virusa hepatitisa C, pa tudi za:

    1. Opredelitve napredovanja bolezni;
    2. Razvoj taktike zdravljenja;
    3. Ocena učinkovitosti terapije;
    4. Predvidevanje kronizacije tekočega procesa nalezljivih bolezni.

    Trajanje zdravljenja je odvisno od identifikacije genotipa virusa, je pomemben dejavnik, ki se uporabljajo za zdravljenje številnih zdravil imajo stranske učinke in se jih bolniki slabo prenašajo.

    Razlaga analize za hepatitis C

    Dešifriranje testov izvaja usposobljeni strokovnjak. Norma prevzema popolno odsotnost RNA virusa, protitelesa proti njim in antigene. Vsebnost protiteles v krvi lahko kaže na prisotnost akutnega ali kroničnega hepatitisa C in potek obdobja okrevanja. Prisotnost v krvi RNA HCV, odkrita v PCR, kaže prisotnost virusa v krvi.

    V primeru kršitev vzorčenja in transporta krvi, pa tudi tehnike izvajanja testa, PCR analiza včasih kaže lažno pozitiven ali dvomljiv rezultat. Analize RIBA in ELISA lahko kažejo lažne pozitivne rezultate v primeru zgodnje faze bolezni, ko telo še ni proizvedlo dovolj protiteles.

    Zdravstvene statistike kažejo, da je trenutno okoli 4% svetovnega prebivalstva okuženih z virusom hepatitisa C. Vendar ta številka ne odraža objektivne resničnosti, ker mnogi ljudje sploh ne vedo, da so nosilci tega virusa. Zato je tako pomembno, da redno preverjate zdravnika in redno opravljate preiskavo krvi za hepatitis. Vsak posamezni test lahko poda dvomljiv rezultat in le v kombinaciji vam omogočajo, da dokončno določite diagnozo in začnete ustrezno zdraviti hepatitis.


    Sorodni Članki Hepatitis